河南省壹零玖生命科学研究院杨士超获国家专利权
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龙图腾网获悉河南省壹零玖生命科学研究院申请的专利一种用于抗炎护肾的黄精肽制备方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119776476B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-10发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510183529.X,技术领域涉及:C12P21/06;该发明授权一种用于抗炎护肾的黄精肽制备方法是由杨士超;葛志勇设计研发完成,并于2025-02-19向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种用于抗炎护肾的黄精肽制备方法在说明书摘要公布了:本申请涉及生物活性肽制备技术领域,公开了一种用于抗炎护肾的黄精肽制备方法,包括以下步骤:1将黄精根茎粉碎后用乙醇溶液进行预处理,得到水提浓缩液;2将水提浓缩液加入缓冲液中提取黄精总蛋白;3将总蛋白溶液与酶进行酶解,酶解条件为酶浓度为底物质量的2%5%,pH范围为7.5‑8.5,温度为45‑55℃,时间为35小时;4将酶解液进行超滤去除大分子杂质后,使用金属修饰介质动态配位分离目标肽段,目标肽段通过逆流分配色谱进行纯化,冷冻干燥后制备得到黄精肽。本发明通过复配酶协同酶解、多位点动态调控和动态配位分离技术,更好的作为抗炎护肾的原料使用,用于预防和辅助治疗肾脏相关疾病。
本发明授权一种用于抗炎护肾的黄精肽制备方法在权利要求书中公布了:1.一种用于抗炎护肾的黄精肽制备方法,其特征在于,包括以下步骤: 1将黄精根茎粉碎后用乙醇溶液进行预处理,得到水提浓缩液; 2将水提浓缩液加入缓冲液中提取黄精总蛋白; 3将总蛋白溶液与酶进行酶解,酶解条件为酶浓度为底物质量的2%-5%,pH范围为7.5-8.5,温度为45-55℃,时间为3-5小时; 4将酶解液进行超滤去除大分子杂质后,使用金属修饰介质动态配位分离目标肽段,分离条件为金属离子浓度为0.1-1mmolL,溶液pH为6.8-7.2; 5目标肽段通过逆流分配色谱进行纯化,冷冻干燥后制备得到黄精肽; 所述酶解反应中使用的酶为胰蛋白酶与木瓜蛋白酶的复配酶,胰蛋白酶与木瓜蛋白酶的质量比为2:1-4:1,总酶浓度为底物质量的2%~5%,酶解液中目标蛋白浓度为5-10mgmL,酶解时间为3-5小时,在反应过程中需动态调整反应条件以确保pH值保持在7.5~8.5范围内; 所述金属修饰介质由以硅胶为基质的金属负载材料制备得到,硅胶基质经稀盐酸处理后负载的金属离子为Zn2+或Cu2+,金属负载浓度为0.1-1mmolL,介质粒径为60-120μm,金属离子负载后经70℃干燥4~6小时以增加稳定性; 所述动态配位分离过程中,酶解液在调节pH至6.8-7.2后以13mLmin的流速通过金属修饰介质柱,未结合的杂质通过20-50mmolL的磷酸盐缓冲液洗脱,目标肽段通过0.1-0.5molL的柠檬酸或EDTA溶液洗脱,洗脱后的溶液需检测目标肽浓度后进行收集; 所述逆流分配色谱纯化使用的流动相为水与乙腈的混合液,体积比为80:20-70:30,梯度洗脱条件为10%至50%乙腈线性梯度洗脱,洗脱时间为15~30分钟,目标肽段的回收率不低于90%。
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