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龙图腾网获悉中国长江三峡集团有限公司申请的专利一种牛耳朵幼苗的繁育方法和应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN117814120B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-10发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202410167373.1，技术领域涉及：A01H4/00；该发明授权一种牛耳朵幼苗的繁育方法和应用是由张海波;敦必成;吴笛;项伟波设计研发完成，并于2024-02-06向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种牛耳朵幼苗的繁育方法和应用在说明书摘要公布了：本发明提供一种牛耳朵幼苗的繁育方法及应用。本发明采用牛耳朵叶片为外植体，通过诱导叶片双面丛生芽的萌发优化了繁育技术体系，获得了大量优质幼苗。该方法可以克服植物取材的生理时间限制，也不会影响物种数量和繁衍，通过诱导叶片双面丛生芽，不仅探索了植物叶片无性系繁育新途径，也达到了植物组织培养外植体利用效率的增长，建立出一套关于牛耳朵的简单、快速、有效的繁育体系。

本发明授权一种牛耳朵幼苗的繁育方法和应用在权利要求书中公布了：1.一种牛耳朵幼苗的繁育方法，其特征在于，包括如下步骤： 步骤1、外植体预处理：选取牛耳朵叶片为外植体，清洗消毒后用无菌滤纸吸干水分； 步骤2、诱导培养：将预处理后的外植体切成2.0cm×2.0cm的块状物，并接种至第一培养基中进行诱导培养，得到具有双面丛生芽的诱导培养物；所述块状物平铺在第一培养基中，叶片放置朝向为背面朝上； 其中，培养方法包括：第1-7天采用暗培养，第8天后采用光照培养，培养温度为23℃±2℃，培养时间为20-25天；所述光照培养具体包括：第8-15天采用LED红白复合光照培养，第15天后采用荧光灯培养，光照培养期间的光照强度为2500-3000lx，光照时间为每天10-13小时；所述第一培养基为无菌培养基，所述无菌培养基为：MS+28.0mgL、ε-聚赖氨酸+1.0mgL、GA3+0.06mgL、KT+0.11mgL、TDZ+1.0mgLNAA；所述无菌培养基的pH值为5.8； 步骤3、增殖培养：将所述诱导培养物从第一培养基中取出，沿垂直于叶面的方向对诱导培养物切“十”字，得到4个第一切割部分；再沿平行于叶面的方向，对第一切割部分进行横切，得到2个含有单面丛生芽的第二切割部分；将含有单面丛生芽的第二切割部分接种至第一培养基中进行增殖培养，得到增殖培养物； 步骤4、壮苗与生根培养：将所述增殖培养物从第一培养基中取出并接种至第二培养基中进行壮苗和生根培养，培养结束后得到牛耳朵幼苗；所述第二培养基为壮苗生根培养基，所述壮苗生根培养基为：A、MS+0.5mlLIBA+0.1%Ac，B、MS+0.1%Ac，C、MS+0.5mlLIBA；所述壮苗生根培养基的pH值为5.8。

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