仲恺农业工程学院王琴获国家专利权
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龙图腾网获悉仲恺农业工程学院申请的专利一种低温中性蛋白酶及其制备方法和应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN117247922B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-10发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202311470068.1，技术领域涉及：C12N9/52；该发明授权一种低温中性蛋白酶及其制备方法和应用是由王琴;谢曦;刘袆帆;肖更生;陈碧瀚设计研发完成，并于2023-11-06向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种低温中性蛋白酶及其制备方法和应用在说明书摘要公布了：本发明属于基因工程及酶工程技术领域，具体涉及一种海洋微生物荷氏科尔韦尔氏菌来源的低温中性蛋白酶及其制备方法和在水解蛋白质中的应用。本发明将来源于荷氏科尔韦尔氏菌的蛋白酶基因与表达载体pPIC9K连接，获得重组质粒，接着将重组质粒电转化至毕赤酵母细胞，并利用甲醇诱导目的基因表达，表达产物离心、去除上清后，即获得重组低温中性蛋白酶。该重组低温中性蛋白酶可以用于鱼粉的水解，而且该重组低温中性蛋白酶在15℃～35℃范围内酶活力较高，在15℃时仍保持在60％以上，是一种在低温或者常温下可以保持较高活性的中性低温金属蛋白酶。
本发明授权一种低温中性蛋白酶及其制备方法和应用在权利要求书中公布了：1.一种水解鱼粉的方法，其特征在于，包括以下步骤： 步骤S1、脱脂鱼粉的制备： 取30g脆肉罗非鱼鱼粉置于100mL的三角瓶中，用以90%乙醇为溶剂，添加10％的乙酸乙酯，总溶料比为10：1mlg，浸泡3h，将三角瓶置于恒温水槽中，装上搅拌及回流装置，在70.0~75.0℃温度下萃取，每次萃取时间为45min，萃取后将料浆进行抽滤，滤饼用20mL95％的乙醇洗涤两到三次，洗涤后将滤饼再次转入三角瓶中，加入90%乙醇溶液继续进行脱毒脱油操作，重复6次，将滤饼置于真空干燥箱中，在60℃下进行减压干燥除去溶剂，粉碎过80目筛，冷冻干燥，得脆肉罗非鱼蛋白粗样品； 步骤S2、水解处理： 以步骤S1制得的脆肉罗非鱼蛋白粗样品为底物，底物浓度为3.0％，在100Ug低温中性蛋白酶的催化作用下，于温度25℃，pH为7.0条件下反应100min，即得； 所述低温中性蛋白酶的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示，其核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。
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