中国科学技术大学瞿昆获国家专利权
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龙图腾网获悉中国科学技术大学申请的专利一种单细胞转录组及染色质可及性双组学测序文库构建方法及测序方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115478098B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-10发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211237949.4,技术领域涉及:C12Q1/6806;该发明授权一种单细胞转录组及染色质可及性双组学测序文库构建方法及测序方法是由瞿昆;高绪远;刘柯设计研发完成,并于2022-10-10向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种单细胞转录组及染色质可及性双组学测序文库构建方法及测序方法在说明书摘要公布了:本申请公开了一种单细胞转录组和染色质可及性双组学单细胞测序文库的构建方法,其包括a制备单细胞悬液;b获取染色质开放位点,c使用逆转录酶和逆转录引物对细胞的转录组进行逆转录反应,以获取单细胞的转录组信息;d使用模板转换寡聚物TSO进行模板转换反应;e后续编码;f初始文库扩增,和g制备测序用染色质开放位点文库以及转录组文库。本申请还公开了一种对单细胞转录组和染色质可及性双组学测序文库测序的方法,其包括将通过所述方法制备的染色质开放位点文库以及转录组文库分别进行测序。
本发明授权一种单细胞转录组及染色质可及性双组学测序文库构建方法及测序方法在权利要求书中公布了:1.一种单细胞转录物和染色质可及性双组学单细胞测序文库的构建方法,其包括以下步骤: a制备单细胞悬液; b获取染色质开放位点,其包括用引物二聚体和Tn5转座酶组装而成的Tn5转座子进行对所述细胞的染色质进行转座反应,对细胞的染色质开放位点进行切割,并将引物二聚体连接到染色质开放位点,所述引物二聚体上含有后续编码整合的把手序列; c使用逆转录酶和逆转录引物对细胞的转录组进行逆转录反应,以获取单细胞的转录组信息; d使用模板转换寡聚物进行模板转换反应; e后续编码以得到带有细胞编码的转录组文库和染色质开放位点文库,所述后续编码包括根据需要采用不同的平台或流程对细胞进行单细胞分离或编码整合,其中来自同一个细胞的转录组文库和染色质开放位点文库带有相同的细胞编码或细胞编码组合; f初始文库扩增,其包括对前面构建的文库进行扩增以增加可供使用的文库片段; g制备测序用染色质开放位点文库以及转录组文库,其包括从上一步扩增的文库分离出染色质开放位点文库和转录组文库, 其中所述模板转换寡聚物如图1所示包含与逆转录酶的末端转移酶活性生成的序列⑧完全互补的序列⑤,使得所述逆转录酶能够以模板转换寡聚物为模板继续进行序列合成,所述模板转换寡聚物还包含位于序列⑤的5’端的部分结构区④以及位于所述部分结构区④的5’端的用于后续编码整合的把手序列③,所述模板转换寡聚物还包含与部分结构区④互补以与模板转换寡聚物形成双链结构的序列⑥, 其中所述图1部分结构区④包括一个或多个功能区,所述功能区选自独特分子识别信号、部分编码和双链互补序列, 所述方法能够将编码连接在染色质开放位点或和转录组上并保留转录组的5’信息。
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