中国科学院植物研究所张梅获国家专利权
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龙图腾网获悉中国科学院植物研究所申请的专利一种应用于植物花粉的CUT&Tag方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115197997B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-10发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202210954689.6,技术领域涉及:C12Q1/6804;该发明授权一种应用于植物花粉的CUT&Tag方法是由张梅;刘函设计研发完成,并于2022-08-10向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种应用于植物花粉的CUT&Tag方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种应用于植物花粉的CUT&Tag方法。本发明所保护的植物花粉的CUT&Tag方法中的细胞核提取液中含有Percoll,用以去除花粉细胞中淀粉。所述方法在去除淀粉后还包括使用含有1,6‑己二醇与甘油的缓冲液去除花粉细胞中多糖和多酚的步骤。所述Percoll在所述细胞核提取液中的浓度可为60%。实验证明,本发明中所建立的植物花粉CUT&Tag方法,可以对花粉中富含的多糖、多酚、高淀粉等杂质做有效的清除,可以有效鉴定植物花粉中DNA与蛋白质之间的相互作用。本发明的方法也可推广至玉米的其它组织或其它植物中DNA与蛋白质之间的相互作用的研究。
本发明授权一种应用于植物花粉的CUT&Tag方法在权利要求书中公布了:1.植物花粉的CUTamp;Tag的方法,其特征在于:所述方法包括如下步骤: A1沉淀目的蛋白:用含有Percoll的提取液从植物花粉中提取细胞核,得到去除花粉细胞中淀粉的细胞核提取液,用含有1,6-己二醇与甘油的提取液去除所述去除花粉细胞中淀粉的细胞核提取液中的多糖和多酚,得到去除花粉细胞中淀粉、多糖和多酚的细胞核提取液,所述细胞核提取液含有结合有DNA的目的蛋白;将靶标抗体与所述去除花粉细胞中淀粉、多糖和多酚的细胞核提取液混合,使所述靶标抗体与所述目的蛋白特异性结合; A2DNA片段化:加入pA-Tn5转座体,得到pA-Tn5转座体与所述靶标抗体及所述目的蛋白的耦合物;所述耦合物含有与所述目的蛋白结合的DNA;所述DNA片段化的过程中不添加蛋白酶抑制剂和细胞膜通透处理液; A3激活pA-Tn5转座体:激活所述pA-Tn5转座体将所述DNA片段化,得到含有片段化DNA的混合液。
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