中国热带农业科学院三亚研究院;中国热带农业科学院热带生物技术研究所言普获国家专利权
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龙图腾网获悉中国热带农业科学院三亚研究院;中国热带农业科学院热带生物技术研究所申请的专利一种AsCas12f分段表达介导的基因编辑方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN121022930B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-06发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202511565415.8,技术领域涉及:C12N15/83;该发明授权一种AsCas12f分段表达介导的基因编辑方法是由言普;孙海艳;黄执辰;庹德财;沈文涛设计研发完成,并于2025-10-30向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种AsCas12f分段表达介导的基因编辑方法在说明书摘要公布了:本发明提供一种AsCas12f基因分段表达介导的基因编辑方法。其要点是将AsCas12f基因分成2个部分,分别克隆到表达载体,2个载体共表达后实现基因编辑。优选的,AsCas12f的前半部分为包括REC、WED和Linker序列,后半部分为包括Linker、RuvC和TNB序列以及gRNA序列和靶基因序列,2个部分含有Linker重叠序列,并且前半部分的3'端加内含肽Intein的5'端序列,后半部分的5'端加Intein的3'端序列,2个部分分别利用植物病毒载体TRV烟草脆裂病毒和PVX马铃薯X病毒表达,实现对目标基因的基因编辑。
本发明授权一种AsCas12f分段表达介导的基因编辑方法在权利要求书中公布了:1.AsCas12f基因分段表达的基因编辑载体,其特征在于,所述基因编辑载体为植物病毒载体,所述基因编辑载体利用植物病毒分段表达基因编辑元件nCas12f-InteinN表达框及InteinC-cCas12f-Linker表达框,形成分别包含nCas12f-InteinN表达框和包含InteinC-cCas12f-Linker表达框的独立表达的基因编辑载体,所述nCas12f-InteinN表达框的序列如SEQIDNO.1所示,所述InteinC-cCas12f-Linker表达框的序列如SEQIDNO.2所示,其中SEQIDNO.2序列中的n为靶基因的编辑位点序列,n的碱基数量范围为15~25个,所述基因编辑载体通过以下步骤获得:将nCas12f-InteinN表达框和InteinC-cCas12f-Linker表达框分别克隆到pNC-TRV2-OE载体或分别克隆到PVX载体上。
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