三亚中国检科院生物安全中心;中国质量检验检测科学研究院;海南省南繁管理局蔡璐璐获国家专利权
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龙图腾网获悉三亚中国检科院生物安全中心;中国质量检验检测科学研究院;海南省南繁管理局申请的专利一种基于RPA-CRISPR/Cas12b技术的水稻白叶枯病菌快速检测方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120924696B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-06发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202511442107.6,技术领域涉及:C12Q1/689;该发明授权一种基于RPA-CRISPR/Cas12b技术的水稻白叶枯病菌快速检测方法是由蔡璐璐;赵文军;马云龙;温国松;田茜;廖忠海;周洋;吴晓颖;孟青青;暴晓阳设计研发完成,并于2025-10-10向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种基于RPA-CRISPR/Cas12b技术的水稻白叶枯病菌快速检测方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种基于RPA‑CRISPRCas12b的水稻白叶枯病菌快速检测方法。所述试剂组合包含特异性RPA引物对和sgRNA,其序列分别如SEQIDNO.1、SEQIDNO.2和SEQIDNO.3所示。检测方法包括:以待测样本核酸为模板,利用所述引物对进行RPA恒温扩增;将扩增产物与sgRNA、Cas12b蛋白及荧光报告分子混合孵育,激活Cas12b的反式切割活性;通过检测荧光信号判断结果。本发明通过将优化的RPA与CRISPR体系集成于离心微流控芯片,实现了全流程闭管化、自动化检测,可在30分钟内完成,灵敏度达0.156pg反应,对Xa、Xap等5种近缘菌无非特异性反应,对XOO3亚型具有高灵敏度,但对XOO2亚型不适用,具有快速、灵敏、特异且设备依赖度低的优点,适用于田间、口岸等现场环境的非诊断性检测。
本发明授权一种基于RPA-CRISPR/Cas12b技术的水稻白叶枯病菌快速检测方法在权利要求书中公布了:1.一种用于检测水稻白叶枯病菌Xanthomonasoryzaepv.oryzae,XOO的试剂组合,其特征在于,包括特异性RPA引物对和sgRNA; 所述RPA引物对由核苷酸序列如SEQIDNO.1所示的上游引物和核苷酸序列如SEQIDNO.2所示的下游引物组成;所述sgRNA能够靶向由所述RPA引物对扩增出的产物中的特异性序列;所述sgRNA的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示。
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