中山大学附属第一医院陶军获国家专利权
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龙图腾网获悉中山大学附属第一医院申请的专利一种研究血管内皮衰老的小鼠模型的构建方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119014373B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-06发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411453850.7,技术领域涉及:C12N15/113;该发明授权一种研究血管内皮衰老的小鼠模型的构建方法是由陶军;夏文豪;丘雨旻设计研发完成,并于2024-10-17向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种研究血管内皮衰老的小鼠模型的构建方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种研究血管内皮衰老的小鼠模型的构建方法,属于基因工程技术领域,利用6030442E23Rik条件性基因敲除小鼠与Tek‑CreERT2小鼠利用CRISPR基因编辑技术,将Cre插入到小鼠Tek基因终止密码子处,是内皮细胞条件性敲除的工具鼠,目前市面上已有这种品系小鼠杂交,获得6030442E23Rik‑‑Tek‑CreERT2小鼠。后将Tamoxifen溶解在玉米油中,使其终浓度为20mgml。后按120mgkg小鼠体重的Tamoxifen剂量,腹腔注射5次,隔天一次,在最后一次注射结束后7天便可获得内皮细胞6030442E23Rik特异性敲除的小鼠模型。内皮细胞6030442E23Rik特异性敲除小鼠模型是一种研究血管内皮衰老的重要小鼠模型。
本发明授权一种研究血管内皮衰老的小鼠模型的构建方法在权利要求书中公布了:1.一种研究血管内皮衰老的小鼠模型的构建方法,其特征在于,该构建方法包括: 利用6030442E23Rik条件性基因敲除小鼠与Tek-CreERT2小鼠杂交,获得6030442E23Rik--Tek-CreERT2小鼠;将Tamoxifen溶解在玉米油中,最终浓度为20mgml,按120mgkg小鼠体重的Tamoxifen剂量,腹腔注射5次,每隔一天注射一次,最后一次注射结束后7天获得内皮细胞6030442E23Rik特异性敲除的小鼠模型; Tek-CreERT2小鼠的构建过程包括: 利用CRISPR基因编辑技术将Cre插入到小鼠Tek基因终止密码子处,获得Tek-CreERT2小鼠; 6030442E23Rik条件性基因敲除小鼠的构建过程包括: 通过体外转录的方式,获得Cas9mRNA和gRNA;通过In-Fusioncloning的方法构建同源重组载体;将Cas9mRNA、gRNA和同源重组载体显微注射到C57BL6J小鼠的受精卵中,获得F0代小鼠,PCR扩增及测序鉴定阳性的F0代小鼠,PCR扩增及测序鉴定阳性的F0代小鼠与C57BL6J小鼠交配获得阳性F1代小鼠; 同源重组载体包含2.9kb5’同源臂、2.2kb的flox区域和2.6kb3’同源臂; flox针对的exon:exon1。
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