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龙图腾网获悉安徽农业大学;临泉县现代农业技术合作推广服务中心(安徽农业大学新农村发展研究院皖西北综合试验站);临泉县中原牧业发展中心申请的专利促性腺激素释放激素六聚体－白喉毒素突变体CRM197的发酵工艺获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115838777B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-06发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202211337783.3，技术领域涉及：C12N1/21；该发明授权促性腺激素释放激素六聚体－白喉毒素突变体CRM197的发酵工艺是由洪绮雯;龚新豹;潘麟茜;潘啸宇;程佳怡;陆君泰;徐爽爽;张为;闫旭;秦平;方富贵;张运海;刘亚;李运生;辛洪雷;刘永法设计研发完成，并于2022-10-28向国家知识产权局提交的专利申请。

本促性腺激素释放激素六聚体－白喉毒素突变体CRM197的发酵工艺在说明书摘要公布了：本发明公开了促性腺激素释放激素六聚体－白喉毒素突变体CRM197的发酵工艺，该工艺包括以下步骤：发酵培养基的筛选和发酵条件的优化。发酵培养基包括酵母浸粉、胰蛋白胨、NaCl，发酵工艺的优化包括培养温度、诱导剂、诱导剂浓度、诱导后培养时间、发酵液酸碱度的调节方式、搅拌速率、通气量等。本发明的发酵工艺生产成本低廉，生产周期短，只需要12‑15h，同时，还提高了单位菌体的目的蛋白表达量，实现了目的蛋白的高效表达。本发明制得的GnRH6‑CRM197可用于各种哺乳动物的免疫去势，具有进一步研发的价值和良好的产业化前景。

本发明授权促性腺激素释放激素六聚体－白喉毒素突变体CRM197的发酵工艺在权利要求书中公布了：1.促性腺激素释放激素六聚体－白喉毒素突变体CRM197的发酵工艺，其特征在于，包括以下步骤： 1平板菌种的准备 将工程菌BL21DE3-pET21a-GnRH6-CRM197划线接种于抗氨苄LB培养基平板，在37℃条件下培养12-15h，得平板菌种作为原始种子； 其中，工程菌BL21DE3-pET21a-GnRH6-CRM197于2022年06月19保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCCNO.25027，分类命名为Escherichiacoli，具体命名为BL21DE3-PET21a-GnRH6-CRM197； 2种子液的制备 将原始种子单菌置于液体培养基中制备为种子液； 3发酵罐发酵培养 取种子液，接种于发酵罐中的发酵培养基上，在37℃下培养3h，加入终浓度为1.0mmolL的异丙基硫代-β-D半乳糖苷，在20℃下继续培养12h，得诱导表达的菌体； 4GnRH6-CRM197的分离纯化 将诱导表达的菌体在4℃下离心分离，弃去上清液，将诱导表达的菌体沉淀重新悬浮于Tris缓冲液中，冷冻菌液后再将其放于冰水上融化，将融化后的菌液在冰水浴上进行超声破碎，超声破碎时加入蛋白酶抑制剂PMSF；将破碎后的菌液在4℃下离心分离，取沉淀液即为粗提物；将粗提物加入8molL尿素溶液在4℃下溶解，溶解后在温度4℃离心分离，取其上清，将上清进行His-tag蛋白纯化树脂亲和层析分离提纯，从而得到目的蛋白GnRH6-CRM197，即为所述促性腺激素释放激素六聚体－白喉毒素突变体CRM197。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术，可联系本专利的申请人或专利权人安徽农业大学;临泉县现代农业技术合作推广服务中心(安徽农业大学新农村发展研究院皖西北综合试验站);临泉县中原牧业发展中心，其通讯地址为：230000 安徽省合肥市蜀山区长江西路130号；或者联系龙图腾网官方客服，联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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