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龙图腾网获悉南京大学申请的专利一种基于化学修饰后的脱氧核酶成像活细胞内镁离子的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115372331B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-06发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202211171658.X，技术领域涉及：G01N21/64；该发明授权一种基于化学修饰后的脱氧核酶成像活细胞内镁离子的方法是由于涵洋;李喆;陈思琪设计研发完成，并于2022-09-26向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种基于化学修饰后的脱氧核酶成像活细胞内镁离子的方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种基于化学修饰后的脱氧核酶成像活细胞内镁离子的方法。属于金属离子成像技术领域，步骤：对脱氧核酶10‑23进行化学修饰，筛选获得在其催化环8号位点修饰羧基Ca12号位点修饰苯环Bn的脱氧核酶10‑23CaBn；进行生物化学表征及对比；构建响应镁离子的荧光传感器；对其性能进行表征；应用于活细胞中进行细胞内镁离子的成像。对比野生型，本发明在更低浓度的镁离子条件下也能催化切割反应；故由其构建成的荧光传感器可更加有效地在体外对更低浓度的镁离子进行荧光响应，检测限达到0.03mM；此外，该荧光传感器可在活细胞内对细胞内源性镁离子进行荧光成像，为分子生物学领域提供了一种新的分子工具。

本发明授权一种基于化学修饰后的脱氧核酶成像活细胞内镁离子的方法在权利要求书中公布了：1.一种基于化学修饰后的脱氧核酶成像活细胞内镁离子的方法，其特征在于，包括如下步骤： 步骤1、利用糖苷酶和氧胺化合物修饰DNA的方法对脱氧核酶10-23进行化学修饰，通过对其催化环上不同位点引入不同化学修饰筛选获得催化活性提升最高的脱氧核酶10-23； 通过对脱氧核酶10-23进行化学修饰后得到了催化活性超未修饰的脱氧核酶800倍的双修饰脱氧核酶，该脱氧核酶在其催化环的8号位点引入了羧基，在12号位点引入了苯环； 步骤2、对化学修饰后活性提升的脱氧核酶10-23进行生物化学表征； 测得的双修饰脱氧核酶10-23在单翻转条件下的一级反应速率常数为4.21min-1；在多翻转条件下的催化常数为1.6min-1； 步骤3、利用化学修饰的脱氧核酶10-23构建为响应镁离子的荧光传感器；使用双修饰脱氧核酶10-23构建响应镁离子的荧光传感器；该荧光传感器在无镁离子的条件下荧光信号稳定，在有镁离子存在的条件下荧光信号增强； 步骤4、在体外缓冲液中对所构建的荧光传感器的性能进行表征；在体外缓冲液中对所构建的荧光传感器的性能进行表征包括灵敏度及特异性； 所构建的荧光传感器在细胞生理条件下对Mg2+具有特异性响应的检测限为0.03mM； 步骤5、将上述荧光传感器应用于活细胞中进行细胞内镁离子的成像； 通过荧光传感器实现对细胞内源性镁离子的成像。

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