广西壮族自治区产品质量检验研究院(广西壮族自治区纤维检验所、广西质量技术评价认证中心)陈德翼获国家专利权
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龙图腾网获悉广西壮族自治区产品质量检验研究院(广西壮族自治区纤维检验所、广西质量技术评价认证中心)申请的专利双信号检测甘蔗梢腐病自供能生物传感器、应用及其检测方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN121068861B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-03发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202511633392.X,技术领域涉及:G01N33/00;该发明授权双信号检测甘蔗梢腐病自供能生物传感器、应用及其检测方法是由陈德翼;蒙泳;黄克靖;温韬;刘绍刚;陈海艳;刁开盛;吴庆念;王士伟;李翠萍;陈燕芬设计研发完成,并于2025-11-10向国家知识产权局提交的专利申请。
本双信号检测甘蔗梢腐病自供能生物传感器、应用及其检测方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种双信号检测甘蔗梢腐病自供能生物传感器、应用及其检测方法,包括CNT@Zn‑MOFAuNPsGOD修饰的生物阳极、CNT@Zn‑MOFAuNPsDNA修饰的生物阴极以及电解液;电解液包括葡萄糖、亚甲基蓝和PBS缓冲溶液;CNT@Zn‑MOFAuNPsGOD是通过CNT@Zn‑MOFAuNPs与GOD孵育得到;CNT@Zn‑MOFAuNPsDNA是通过CNT@Zn‑MOFAuNPs、S1链以及OutputDNA孵育得到。该自供能生物传感器结合电化学检测与比色检测两种独立信号通道,双重验证检测结果,有效防止假阳性,可实现甘蔗梢腐病的准确诊断。
本发明授权双信号检测甘蔗梢腐病自供能生物传感器、应用及其检测方法在权利要求书中公布了:1.一种双信号检测甘蔗梢腐病自供能生物传感器,其特征在于,所述自供能生物传感器包括:阳极、阴极以及电解液;所述阳极为CNT@Zn-MOFAuNPsGOD修饰的生物阳极锌金属有机框架包覆碳纳米管金纳米颗粒葡萄糖氧化酶;所述阴极为CNT@Zn-MOFAuNPsDNA修饰的生物阴极;所述电解液包括:葡萄糖、亚甲基蓝和PBS缓冲溶液; 其中,CNT@Zn-MOFAuNPsGOD是通过CNT@Zn-MOFAuNPs与GOD孵育得到;CNT@Zn-MOFAuNPsDNA是通过CNT@Zn-MOFAuNPs、S1链以及OutputDNA孵育得到,所述S1链是一种单链并与OutputDNA碱基互补配对; 所述生物阴极的制备包括以下步骤: 1将30-50μL的CNT@Zn-MOFAuNPs滴涂在碳布电极表面,35-40℃干燥2-4h后,涂滴上10-30μL作为基因信号接收探针的S1链,3-6℃下放置11-14h,加入20-50μL浓度为0.5-2mM的六巯基己醇反应15-45min,吸去多余六巯基己醇,接着滴加20-50μL纯净水,使用擦镜纸吸取水分,以去除电极表面过量的六巯基己醇; 2将20-50μL扩增部分最终输出得到的OutputDNA滴涂于上述步骤1得到的修饰电极表面,35-40℃下孵育后得到生物阴极CNT@Zn-MOFAuNPsDNA; 所述步骤2中所述OutputDNA的制备包括以下步骤: 2.1发夹H1基因链的制备:将未处理的核苷酸链H1在93-97℃下退火10min; 2.2封闭式触手基因链A1A2的构成:将等量的核苷酸链A1和核苷酸链A2放置于35-40℃下孵育1.5-2h; 2.3基因链H1A3的构成:将30µL的发夹H1基因链与15µL的核苷酸链A3混合并在37℃下孵育2h,得到基因链H1A3; 2.4磁珠A1A2基因链H1A3前驱体物质的制备:将上述制备的发夹H1基因链、封闭式触手基因链A1A2、磁珠以及基因链H1A3混合并在摇床中35-40℃下孵育10-14h,并分离未修饰到磁珠表面的A1、A2、基因链H1A3; 2.5DNAzyme启动:将目标病原菌特定基因与磁珠A1A2基因链H1A3前驱体物质混合35-40℃下孵育2h后,加入Mg2+在35-40℃下孵育0.5-1h,接着使用磁铁在外磁场的作用下分离出G4链体; 2.6OutputDNA的制备:向步骤2.5的剩余溶液中加入1-5μL10UμLExoⅢ核酸外切酶,35-40℃下孵育0.5-1.5h,得到产物OutputDNA; 所述CNT@Zn-MOFAuNPs的制备包括以下步骤: CNT@Zn-MOF的制备:先将15mg碳纳米管溶解在60毫升甲醇中超声30min,加入4g2-甲基咪唑形成澄清溶液;然后,将1.68gZnNO32·6H2O溶解在20ml甲醇中,加入上述澄清溶液中,而后进行剧烈搅拌1h;接着,将混合物在室温下静置;24h后,对静置后的混合物通过离心分离,去掉上层液体,将下层沉淀使用去离子水和甲醇多次洗涤,最后在真空条件下过夜干燥,得到CNT@Zn-MOF; CNT@Zn-MOFAuNPs的制备:将CNT@Zn-MOF研磨至粉末,加入乙酸和AuNPs超声,得到CNT@Zn-MOFAuNPs; 其中,所述目标病原菌特定基因的基因序列为:5’-GTTGTAAACTCGGTAATGATCCCT-3’;所述核苷酸链A1的基因序列为:5’-NH2-AAAAAAAGTTCTAAATCGGCTAGCTACAACGATGATCCC-3’;所述核苷酸链A2的基因序列为:5’-CCAGGGATCATTACCGAGTTTACAACCC-3’;所述核苷酸链A3的基因序列为:5’-ACATCATAGGGTGGGACATCATAGGGTGGG-NH2-3’;所述H1的基因序列为:5’-AGGGTGGGGAGGGTGATCAraGATTTAGTCCCCACCCTTGATGCAT-3’;所述S1链的基因序列为:5’-SH-CCCACCCTATGATGC-3’。
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