北京百奥益康医药科技有限公司刘杰获国家专利权
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龙图腾网获悉北京百奥益康医药科技有限公司申请的专利一种软骨组织单细胞的提取试剂盒及其提取方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN121006396B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-03发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202511544626.3,技术领域涉及:C12Q1/6806;该发明授权一种软骨组织单细胞的提取试剂盒及其提取方法是由刘杰;连彩;石菲菲;王盼飞;张楠;张素维设计研发完成,并于2025-10-28向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种软骨组织单细胞的提取试剂盒及其提取方法在说明书摘要公布了:本发明涉及一种软骨组织单细胞的提取试剂盒及其提取方法,所述试剂盒包括:1第一酶解用酶,所述第一酶解用酶包括胰蛋白酶、软骨素酶ABC和岩藻糖苷酶中的一种或多种;2第二酶解用酶,所述第二酶解用酶包括胶原蛋白酶II、中性蛋白酶II、透明质酸酶和DnaseI;3基础液,所述基础液包括基础培养基和或缓冲液。本发明还提供了使用所述试剂盒从软骨组织提取单细胞的方法。本发明制备的软骨组织单细胞悬液具有高的细胞得率和高的活性等优点,具有广阔的应用前景。
本发明授权一种软骨组织单细胞的提取试剂盒及其提取方法在权利要求书中公布了:1.一种软骨组织单细胞的提取方法,其特征在于: 所述提取方法采用软骨组织单细胞提取试剂盒进行; 所述软骨组织单细胞提取试剂盒包括:1第一酶解用酶,所述第一酶解用酶由胰蛋白酶、软骨素酶ABC和岩藻糖苷酶中的两种组成;2第二酶解用酶,所述第二酶解用酶包括胶原蛋白酶II、中性蛋白酶II、透明质酸酶和DnaseI;3基础液,所述基础液包括基础培养基和或缓冲液; 所述方法包括如下步骤: 1组织剪碎:将软骨组织剪碎成碎片; 2第一阶段酶解,使用由第一酶解用酶和基础液配制得到的第一酶解液对所述碎片进行酶解,然后离心,弃上清,得到第一酶解材料; 3第二阶段酶解,使用由第二酶解用酶和基础液配制得到的第二酶解液对所述第一酶解材料进行酶解,然后使用网筛进行过滤,得到滤液; 4将所述滤液离心,收集沉淀作为目标单细胞; 在步骤2的所述第一酶解液中:胰蛋白酶的浓度为0.05重量体积%至0.25重量体积%;软骨素酶ABC的浓度为0.1UmL至1UmL;和或岩藻糖苷酶的浓度为0.1UmL至2.0UmL; 在步骤3的所述第二酶解液中:胶原蛋白酶II的浓度为0.05重量体积%至0.2重量体积%;中性蛋白酶II的浓度为0.05重量体积%至0.3重量体积%;透明质酸酶的浓度为0.1UmL至0.5UmL;和或DnaseI的浓度为0.05mgmL至0.5mgmL。
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