大连民族大学阮成江获国家专利权
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龙图腾网获悉大连民族大学申请的专利一种农杆菌介导浸花的沙棘遗传转化方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN117867015B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-03发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202311782371.5，技术领域涉及：C12N15/84；该发明授权一种农杆菌介导浸花的沙棘遗传转化方法是由阮成江;李景滨设计研发完成，并于2023-12-22向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种农杆菌介导浸花的沙棘遗传转化方法在说明书摘要公布了：本发明属于林木基因工程技术领域，公开了一种农杆菌介导浸花的沙棘遗传转化方法。包括花枝选择、农杆菌的活化和培养、农杆菌转化液的制备、侵染沙棘植株、mCherry荧光检测、mCherry表达量检测。利用含mCherry报告基因的农杆菌LBA4404菌液浸染沙棘授粉后雌花花序，获得转基因果实，不仅可以大大缩短转化周期，实验结果通过荧光观察也比较直观，且能够长期稳定表达，为沙棘基因功能验证提供了一种快速可靠的方法，同时可以为培养转基因沙棘新品种奠定基础。
本发明授权一种农杆菌介导浸花的沙棘遗传转化方法在权利要求书中公布了：1.一种农杆菌介导浸花的沙棘遗传转化方法，其特征在于，步骤包括： S1.花枝选择：取长度40-60cm，无病虫害、授粉期间雌花饱满的沙棘枝条； S2.农杆菌的活化和培养：使用冻融法将含有mCherry报告基因的载体pCAMBIA-1300质粒转入LBA4404农杆菌感受态细胞，在含有链霉素、利福平和卡那霉素的YEB液体培养基中培养，其中mCherry报告基因序列如SEQIDNO.1所示； S3.农杆菌转化液的制备：将培养好含有pCAMBIA-1300-mCherry表达载体的农杆菌菌液离心后用缓冲液重悬菌体，制备出的农杆菌转化液的OD600值为0.8-1.0； S4.侵染沙棘植株：将含有花序的沙棘枝条在重悬菌液中浸染10-15分钟；20-24℃暗培养2-3天后正常培养，3个月后收集成熟果实，所述暗培养过程中隔1天使用重悬菌液再次侵染1次； S5.mCherry荧光检测：使用LUYOR-3415RG手持式荧光观测仪进行观测； S6.mCherry表达量检测：提取果实总RNA，使用qRT-pCR分析mCherry基因的表达量变化情况。
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