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龙图腾网获悉中国医学科学院肿瘤医院申请的专利用于淫羊藿和补骨脂特异质肝损伤成分筛选的检定方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116990469B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-03发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310742861.6，技术领域涉及：G01N33/15；该发明授权用于淫羊藿和补骨脂特异质肝损伤成分筛选的检定方法是由李春雨;李国辉;李蓥滢;曹波设计研发完成，并于2023-06-21向国家知识产权局提交的专利申请。

本用于淫羊藿和补骨脂特异质肝损伤成分筛选的检定方法在说明书摘要公布了：本发明提供了一种用于淫羊藿和补骨脂特异质肝损伤成分筛选的检定方法，包括配制母液、配制稀释液、细胞给药后测定、动物实验验证和代谢组学分析的步骤。本发明对淫羊藿、补骨脂药材进行成分挖掘，发现了TNF‑α诱导的免疫应激、淫羊藿和补骨脂中免疫促进成分和肝损伤易感成分协同导致肝损伤。为淫羊藿和补骨脂配伍导致肝损伤的早期预警、诊断与治疗提供潜在生物学靶点，保障其临床安全合理用药。

本发明授权用于淫羊藿和补骨脂特异质肝损伤成分筛选的检定方法在权利要求书中公布了：1.一种用于淫羊藿和补骨脂特异质肝损伤成分筛选的检定方法，所述方法包括下述步骤： a.配制TNF-α、淫羊藿和补骨脂单体成分母液 TNF-α母液：取TNF-α粉末制备0.1mgmL储备液； 淫羊藿和补骨脂化学成分母液的制备：选定10种淫羊藿单体成分和11种补骨脂单体成分，精密称取各成分适量置于1.5mL灭菌的EP管中，用细胞级DMSO溶解，配置成母液，分装置于-80℃储存备用； b.配制TNF-α、淫羊藿和补骨脂单体成分稀释液 取出TNF-α母液，避光室温放置2h，用纯DMEM培养基将其稀释备用； 现用现取各单体成分母液，用纯DMEM培养基将其稀释为不同浓度的单体成分稀释液，备用； c.细胞给药及测定 培养：将人肝癌HepG2细胞系接种于96孔细胞培养板中，细胞在培养箱内培养24小时后给药； 预先刺激：吸出培养基，先向每孔加入100μLTNF-α稀释液或其DMSO载体DMEM，放入培养箱内孵育2h后给药； 给药：直接向每孔中加入50μL对应浓度的淫羊藿和或补骨脂单体成分稀释液或其DMSO载体；联合给药时，补骨脂甲素浓度为33.33μM，其余药物浓度范围为6.25-66.67μM； 测定：给药后放入培养箱中孵育时间为24h； 指标：测定乳酸脱氢酶LDH释放量，以此作为指标评价细胞毒性 d.动物实验验证 采用小鼠建立TNF-α诱导的免疫特异质肝损伤模型：首先给予小鼠TNF-α溶液或其载体，一段时间后给予小鼠不同浓度的淫羊藿苷和或补骨脂甲素或其载体，设定给药时间摘除小鼠眼球取血，并采用装有肝素钠的抗凝管收集离体血液，同时采集小鼠肝脏组织；测定小鼠血浆中谷丙转氨酶和乳酸脱氢酶含量，以ALT和LDH作为初步考察指标体内验证免疫促进成分和肝损伤易感成分协同诱导肝损伤； e.代谢组学分析 肝组织样本处理后使用超高效液相色谱和串联质谱分析，将分析结果进一步做代谢组学分析。

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