成都玛雅光年科技有限公司;无锡博奥玛雅医学科技有限公司林梦杰获国家专利权
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龙图腾网获悉成都玛雅光年科技有限公司;无锡博奥玛雅医学科技有限公司申请的专利一种增强单分子免疫检测信号的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116660524B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-03发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310656996.0,技术领域涉及:G01N33/543;该发明授权一种增强单分子免疫检测信号的方法是由林梦杰;张文静;杨芮;李东设计研发完成,并于2023-06-05向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种增强单分子免疫检测信号的方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种增强单分子免疫检测信号的方法,步骤如下:1100μL磁珠3mg去上清,用25mMMESpH5.0清洗两次;用25mMMESpH5.0,预冷的配制50mgmLEDC和NHS,各取50μL加入到已清洗的磁珠中,室温混匀30min,25mMMESpH5.0清洗两次,复溶至100μL;加入12‑60μg捕获抗体、30‑3000pmol多聚‑L‑酪氨酸、30‑3000pmol多聚‑L‑色氨酸、30‑3000pmol多聚‑L‑苯丙氨酸,室温混匀至少30min或4℃混匀2小时,PBS缓冲液清洗2次;复溶于200μL25mMTrispH7.2,室温混匀30min,清洗3次,复溶于100μLPBS缓冲液;2免疫反应;3酶催化反应;4数据处理。本发明通过在磁珠上交联多聚芳香族氨基酸,增加酪胺信号放大方法中酪胺试剂催化沉淀反应的基团,最终可以增加单分子免疫检测的灵敏度。
本发明授权一种增强单分子免疫检测信号的方法在权利要求书中公布了:1.一种增强单分子免疫检测信号的方法,其特征在于,所述的方法包括以下步骤: 步骤一、磁珠包被;具体为: 1.1、清洗:100μL、3mg磁珠去上清,用pH5.0、25mMMES清洗两次; 1.2、活化:用pH5.0,预冷的25mMMES配制50mgmLEDC和NHS,各取50μL加入到已清洗的磁珠中,室温混匀30min,pH5.0、25mMMES清洗两次,复溶至100μL; 1.3、抗体包被:加入12-60μg捕获抗体、多聚芳香族氨基酸、室温混匀至少30min或4℃混匀2小时,PBS缓冲液清洗2次; 1.4、封闭:复溶于pH7.2、200μL25mMTris,室温混匀30min,清洗3次, 复溶于100μLPBS缓冲液,即得包被磁珠; 所述的多聚芳香族氨基酸上包含单体或多聚物基团,所述的单体或多聚物基团包括PEG,碳链,寡核苷酸,荧光素,淬灭基团,氨基,羧基,醛基,丙烯酰胺基,叠氮,炔基,二苯基环辛炔,马来酰亚胺,生物素,脱硫生物素,巯基,二硫醇,二茂铁常见交联和修饰基团;多聚芳香族氨基酸为线性、分支结构、环状结构或者这些结构的任意组合。
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