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龙图腾网获悉中国农业科学院北京畜牧兽医研究所申请的专利一种快大型肉鸡饲料代谢能的仿生消化测定试剂盒及测定方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116500188B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-03发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310399354.7，技术领域涉及：G01N31/00；该发明授权一种快大型肉鸡饲料代谢能的仿生消化测定试剂盒及测定方法是由解竞静;叶晓梦;赵峰;宋明强;张虎;王钰明;萨仁娜设计研发完成，并于2023-04-14向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种快大型肉鸡饲料代谢能的仿生消化测定试剂盒及测定方法在说明书摘要公布了：本发明提供一种快大型肉鸡饲料代谢能的仿生消化测定试剂盒及测定方法，该试剂盒包括消化酶I、消化酶II、缓冲液I、缓冲液II和三氯乙酸。该测定方法包括：模拟消化液、缓冲液制备；预热、上样；胃模拟消化；小肠模拟消化；水解产物的清洗；未消化残渣的处理及消化能值的计算。本发明提供的试剂盒及测定方法可以实现对快大型肉鸡饲料代谢能值的快速准确测定。

本发明授权一种快大型肉鸡饲料代谢能的仿生消化测定试剂盒及测定方法在权利要求书中公布了：1.一种快大型肉鸡饲料代谢能的仿生消化测定方法，其特征在于，所用快大型肉鸡饲料代谢能的仿生消化测定试剂盒，包括如下组成： 消化酶I：胃蛋白酶60000U； 消化酶II：淀粉酶64170U；胰蛋白酶10120U；糜蛋白酶2990U； 缓冲液I：磷酸二氢钠24.00g；氯化钠3.39g；氯化钾5.07g； 缓冲液II：氯化钠3.86g；氯化钾3.58g；磷酸氢二钠4.89g；磷酸二氢钠43.86g；苯甲酸钠10g；山梨酸钾10g； 1.25molL三氯乙酸30mL； 测定方法包括如下步骤：1模拟消化液、缓冲液制备 模拟胃液的制备：将该仿生消化测定试剂盒中的消化酶I溶解于41℃下pH3.66的250mL盐酸溶液中制成模拟胃液； 浓缩模拟小肠液的制备：将该仿生消化测定试剂盒中的消化酶II溶解于30mL去离子水中并快速涡旋溶解2分钟，制成浓缩模拟小肠液； 胃缓冲液的制备：将该仿生消化测定试剂盒中的缓冲液I溶解于1800mL去离子水中，用6molL的盐酸在41℃下调节溶液的pH至3.66，然后定容至2000mL制成胃缓冲液； 小肠缓冲液的制备：将该仿生消化测定试剂盒中的缓冲液II溶解于1800mL去离子水中并用6molL的磷酸或6molL的氢氧化钠在41℃下调节溶液的pH至6.18，然后，定容至2000mL制成小肠缓冲液； 2预热、上样 采用单胃动物仿生消化系统，其包括模拟消化器、消化液试剂瓶、缓冲液试剂瓶、废液收容瓶、清洗液储存瓶、清洗液试剂瓶和清洗残留液收容瓶，该模拟消化器包括玻璃管和透析袋，该玻璃管为一中空管体，该管体的两端各设有一磨口，该管体的侧面设有输入管和输出管，该透析袋放置在该玻璃管内，该透析袋的两端分别从该玻璃管的两个磨口处伸出而外翻，外翻露于磨口外侧的透析袋端部被橡皮条捆扎固定在磨口上，捆扎透析袋端部后的两个磨口分别塞有一翻口硅胶塞和一带有输液管的硅胶塞； 将步骤1制备的浓缩模拟小肠液放入该单胃动物仿生消化系统的消化液试剂瓶中；将步骤1中制备的胃缓冲液、小肠缓冲液放入该单胃动物仿生消化系统的缓冲液控温室；在该单胃动物仿生消化系统41℃预热60分钟后，将准确称取2g粉碎后过60目标准筛的鸡饲料样品倒入该单胃动物仿生消化系统的模拟消化器的透析袋内，并向该透析袋内加入步骤1制备的20mL模拟胃液，塞上带有输液管的硅胶塞；每个样品测定5个重复，每个重复使用1根模拟消化器； 3胃模拟消化： 将1000mL胃缓冲液泵入到5根串联的单胃动物模拟消化器的透析袋外再回到胃缓冲液试剂瓶中往复循环，通过回旋震荡提供模拟胃液与饲料样品的混合动力，进行胃的模拟消化；消化结束后排出该模拟消化器中透析袋外的胃缓冲液；然后，将1000mL小肠缓冲液泵入到该单胃动物模拟消化器的透析袋外再回到小肠缓冲液试剂瓶中往复循环，以使透析袋内溶液的pH由胃的理化环境自动切换为小肠的消化环境； 4小肠模拟消化： 向该模拟消化器的透析袋内注入浓缩模拟小肠液，将该小肠缓冲液继续泵入到该单胃动物模拟消化器的透析袋外再回到小肠缓冲液试剂瓶中一直往复循环，通过回旋震荡提供浓缩模拟小肠液与饲料样品的混合动力，开始小肠的模拟消化；消化结束后排出模拟消化器中透析袋外的缓冲液；然后，泵入1.25molL三氯乙酸溶液，混合5分钟后，终止消化； 5水解产物的清洗： 往该5根串联的单胃动物模拟消化器的透析袋外泵入去离子水，再回流到去离子水瓶中往复循环，结束后排出模拟消化器中透析袋外的清洗液，重复清洗6次，以清洗整个模拟消化阶段残留在透析袋中的水解产物； 6未消化残渣的处理及酶水解物能值的计算： 将步骤5透析袋内的未消化残渣转移到培养皿中，在65℃烘干至无水痕后，再在105℃下烘至恒重，冷却后称重；然后，将培养皿中的未消化残渣全部刮下，转移至已知绝干重量的玻璃砂坩埚中，用无水乙醇冲洗未消化残渣3次，确保未消化残渣与乙醇充分混合，至滤出液无色为止，然后，将带有脱脂未消化残渣的玻璃砂坩埚置于105℃恒温干燥箱内烘至恒重；同时，将刮取未消化残渣后的培养皿置于105℃恒温箱内烘至恒重；根据饲料上样重量和总能以及脱脂后未消化残渣的重量和总能计算体外消化能； 其中：所述步骤3胃模拟消化中：混合频率，180rpm；胃模拟消化时间，1h；胃缓冲液流速120~150mL分钟；胃缓冲液排空时间，3分钟；胃-小肠模拟消化切换时间0.5h； 所述步骤4小肠模拟消化中：混合频率，180rpm；浓缩模拟小肠液泵入体积，3mL根模拟消化器；小肠缓冲液流速120~150mL分钟；小肠模拟消化时间，5h；小肠缓冲液排空时间，3分钟；1.25molL三氯乙酸溶液泵入体积，2mL根模拟消化器； 步骤5水解产物的清洗中，去离子水1400~1600mL5根模拟消化器，清洗时间，120分钟次。

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