武汉大学程晓明获国家专利权
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龙图腾网获悉武汉大学申请的专利基于Spacer基因定向插入HiBit标签的细胞系、重组病毒及其制备方法与应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116064659B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-03发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202210890946.4,技术领域涉及:C12N15/85;该发明授权基于Spacer基因定向插入HiBit标签的细胞系、重组病毒及其制备方法与应用是由程晓明;赵莉;夏宇尘设计研发完成,并于2022-07-27向国家知识产权局提交的专利申请。
本基于Spacer基因定向插入HiBit标签的细胞系、重组病毒及其制备方法与应用在说明书摘要公布了:本发明提供了一种基于Spacer基因定向插入HiBit标签的细胞系、重组病毒及其制备方法与应用,将载体pCDN3.1‑CMV‑G418通过SacIPmeI双酶切获得线性化片段,将SEQIDNO.4‑SEQIDNO.5所示引物和SEQIDNO.6‑SEQIDNO.7所示引物对D型HBV1.3倍体质粒扩增获得片段1和片段2,与所述线性化片段通过无缝克隆获得重组质粒,经ScaI单酶切后转染肝癌细胞,经抗性筛选获得基于Spacer基因定向插入HiBit标签的具有复制能力的细胞系。源于该细胞模型可获得具有复制感染能力的新型重组病毒,可完成病毒的整个生活周期,实现简单快速的检测和抗病毒药物高通量的筛选。
本发明授权基于Spacer基因定向插入HiBit标签的细胞系、重组病毒及其制备方法与应用在权利要求书中公布了:1.一种基于Spacer基因定向插入HiBit标签的细胞系的制备方法,其特征在于,所述方法包括: 将载体pCDN3.1-CMV-G418通过SacIPmeI双酶切,获得线性化载体骨架片段; 将SEQIDNO.4-SEQIDNO.5所示引物和SEQIDNO.6-SEQIDNO.7所示引物对D型HBV1.3倍体质粒进行扩增,分别获得片段1和片段2; 将所述线性化载体骨架片段、片段1和片段2通过同源重组和转化,获得重组质粒pCDN3.1-CMV-HBV1.3-HiBit-G418; 将所述重组质粒pCDN3.1-HBV1.3-HiBit-G418经ScaI单酶切获得线性化片段,后转染HepG2细胞并通过G418抗性筛选,获得多克隆细胞系;将所述多克隆细胞系通过G418抗性筛选,获得基于Spacer基因定向插入HiBit标签的细胞系。
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