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龙图腾网获悉南京启真基因工程有限公司申请的专利制备纯毛发及指趾甲型外胚叶发育不良模型猪核移植供体细胞的方法及其专用基因编辑系统获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115927193B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-03发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202211039187.7，技术领域涉及：C12N5/10；该发明授权制备纯毛发及指趾甲型外胚叶发育不良模型猪核移植供体细胞的方法及其专用基因编辑系统是由牛冬;汪滔;马翔;王磊;程锐;赵泽英;方园;胡世芳设计研发完成，并于2022-08-29向国家知识产权局提交的专利申请。

本制备纯毛发及指趾甲型外胚叶发育不良模型猪核移植供体细胞的方法及其专用基因编辑系统在说明书摘要公布了：本发明公开了制备纯毛发及指趾甲型外胚叶发育不良模型猪核移植供体细胞的方法及其专用基因编辑系统。本发明提供了制备重组猪细胞的方法：将HOXC13‑gRNA1、HOXC13‑gRNA4和NCN蛋白共转染猪细胞，得到重组猪细胞。所述重组猪细胞为HOXC13基因发生突变的重组细胞。本发明提供了包括SEQIDNO：16所示HOXC13‑gRNA1、SEQIDNO：17所示HOXC13‑gRNA4和NCN蛋白的试剂盒。试剂盒的用途为：制备重组猪细胞；制备纯毛发及指趾甲型外胚叶发育不良症模型猪；制备纯毛发及指趾甲型外胚叶发育不良症细胞模型或纯毛发及指趾甲型外胚叶发育不良症组织模型或纯毛发及指趾甲型外胚叶发育不良症器官模型。本发明对于纯毛发及指趾甲型外胚叶发育不良症药物的研发及揭示该病的发病机制具有重大应用价值。

本发明授权制备纯毛发及指趾甲型外胚叶发育不良模型猪核移植供体细胞的方法及其专用基因编辑系统在权利要求书中公布了：1.一种制备重组猪细胞的方法，包括如下步骤：将HOXC13-gRNA1、HOXC13-gRNA4和NCN蛋白共转染猪细胞，得到重组猪细胞； 所述HOXC13-gRNA1为sgRNA，其靶序列结合区如SEQIDNO：16中第3-22位核苷酸所示；所述HOXC13-gRNA4为sgRNA，其靶序列结合区如SEQIDNO：17中第3-22位核苷酸所示；所述NCN蛋白如SEQIDNO：3所示； 所述NCN蛋白的制备方法包括如下步骤： 1将质粒pKG-GE4导入大肠杆菌BL21DE3，得到重组菌； 2采用液体培养基30℃培养所述重组菌，然后加入IPTG并25℃诱导培养，然后收集菌体； 3将收集的菌体进行菌体破碎，收集粗蛋白溶液； 4采用亲和层析从所述粗蛋白溶液中纯化具有His6标签的融合蛋白； 5采用具有His6标签的肠激酶酶切具有His6标签的融合蛋白，然后采用Ni-NTA树脂去除具有His6标签的蛋白，得到纯化的NCN蛋白； 所述质粒pKG-GE4如SEQIDNO：1所示； HOXC13-gRNA1、HOXC13-gRNA4和NCN蛋白的质量配比依次为1：1：4。

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