上海交通大学丁显廷获国家专利权
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龙图腾网获悉上海交通大学申请的专利基于可淬灭适配体探针的单细胞免疫印迹方法及其应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115754302B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-03发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211439586.2,技术领域涉及:G01N33/68;该发明授权基于可淬灭适配体探针的单细胞免疫印迹方法及其应用是由丁显廷;徐丽;谢海洋设计研发完成,并于2022-11-17向国家知识产权局提交的专利申请。
本基于可淬灭适配体探针的单细胞免疫印迹方法及其应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种基于可淬灭适配体探针的单细胞免疫印迹方法,涉及单细胞蛋白质检测技术领域。包括如下步骤:S1将单细胞悬液样本沉降在复合水凝胶芯片上的微孔阵列中;S2将复合水凝胶芯片放入电泳槽,然后缓缓倒入裂解液,孵育裂解;S3细胞裂解后,在芯片两端施加电场,蛋白在电场的作用下进入芯片表面的凝胶涂层中开始电泳分离;S4凝胶电泳结束后,将芯片放置于紫外灯下曝光,待曝光结束后,取出胶;S5将胶置于靶向结合目标蛋白的适配体探针溶液中,浸泡染色,在激光共聚焦荧光显微镜下,测定目标蛋白分子的荧光信号强度。本发明可提高目标蛋白的检测灵敏度,成像速度快。
本发明授权基于可淬灭适配体探针的单细胞免疫印迹方法及其应用在权利要求书中公布了:1.基于可淬灭适配体探针的单细胞免疫印迹方法在制备检测或测定一种或多种蛋白质分析物物质的试剂中的应用,所述基于可淬灭适配体探针的单细胞免疫印迹方法,包括如下步骤: S1将单细胞悬液样本沉降在复合水凝胶芯片上的微孔阵列中; S2将复合水凝胶芯片放入电泳槽,然后缓缓倒入裂解液,孵育裂解; S3细胞裂解后,在芯片两端施加电场,蛋白在电场的作用下进入芯片表面的凝胶涂层中开始电泳分离; S4凝胶电泳结束后,将芯片放置于紫外灯下曝光,待曝光结束后,取出胶; S5将胶置于靶向结合目标蛋白的适配体探针溶液中,浸泡染色,在激光共聚焦荧光显微镜下,测定目标蛋白分子的荧光信号强度; S6将胶置于淬灭探针溶液中,浸泡淬灭,在激光共聚焦荧光显微镜下,测定目标蛋白分子的荧光信号强度,所述淬灭探针为适配体探针的互补链; 步骤S5中,所述适配体探针选自偶联荧光或发光基团、量子点基团中任意一种的DNA或RNA,适配体探针分子量为1-15KDa,适配体探针的孵育浓度为2-100nM,浸泡染色5-120min; 步骤S6中,所述淬灭探针选自偶联卤素离子、重金属离子、具有氧化性的有机化合物、氧分子淬灭剂中任意一种的DNA或RNA,淬灭探针长度为7bp,淬灭探针的浓度为20-1000nM,淬灭1-120min。
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