重庆医科大学;重庆医科大学附属第一医院陈非鱼获国家专利权
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龙图腾网获悉重庆医科大学;重庆医科大学附属第一医院申请的专利D-p驱动探针及基于该探针的Cas12a级联扩增方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120966820B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-01-27发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202511517372.6,技术领域涉及:C12N15/11;该发明授权D-p驱动探针及基于该探针的Cas12a级联扩增方法是由陈非鱼;汤漫;刘张玲;杨甜甜设计研发完成,并于2025-10-23向国家知识产权局提交的专利申请。
本D-p驱动探针及基于该探针的Cas12a级联扩增方法在说明书摘要公布了:本发明公开了D‑p驱动探针及基于该探针的Cas12a级联扩增方法,属于分子诊断技术领域,D‑p驱动探针的基本结构为带有呼吸位点的发夹型DNA,由双链茎部和单链环部组成,其中单链环部为反式剪切区;双链茎部包括激活剂、立足点、封闭区和呼吸位点。通过上述方式,D‑p驱动探针兼具Cas12a反式切割底物和靶标激活剂的双重功能,能够将Cas12a的靶标识别与反式切割活性串联起来,实现高效的信号级联放大;同时D‑p驱动探针中引入的呼吸位点使得切割后仅暴露激活剂立足点,而不影响关键功能区域,从而避免误切割,保障信号的有效传递;除此之外,基于D‑p驱动探针的邻位变构激活机制可显著抑制Cas12a的脱靶效应,有效提高了识别特异性。
本发明授权D-p驱动探针及基于该探针的Cas12a级联扩增方法在权利要求书中公布了:1.一种D-p驱动探针,其特征在于,D-p驱动探针的基本结构为带有呼吸位点的发夹型DNA,由双链茎部和单链环部组成;其中单链环部为反式剪切区c; 双链茎部包括激活剂a、立足点b、封闭区d和呼吸位点; 将Cas12a的激活功能的激活剂a与反式剪切功能的反式剪切区c串联; 所述激活剂a被封闭区d封闭,激活剂a与封闭区d均为单链,同时在封闭区d中引入了一个呼吸位点,呼吸位点使得D-p探针被Cas12a剪切后,能够在呼吸作用的驱动下暴露激活剂a的立足点b,进而通过该立足点b进行链置换,激活下一个Cas12a分子,如此循环,形成一个靶标激活N个Cas12a的指数扩增效应; D-p驱动探针的反式剪切区位于crRNA的3’端; crRNA的序列为SEQIDNO.6; D-p驱动探针的制备方法,由H链和L链杂交制备而成,H链的序列为SEQIDNO.1,L链的序列为SEQIDNO.2。
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