华东理工大学叶邦策获国家专利权
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龙图腾网获悉华东理工大学申请的专利一种探针组及其结合3D打印微流控芯片对外泌体表面特定糖蛋白唾液酸分析的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120174094B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-01-27发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510364835.3,技术领域涉及:C12Q1/6886;该发明授权一种探针组及其结合3D打印微流控芯片对外泌体表面特定糖蛋白唾液酸分析的方法是由叶邦策;徐慧颖;张阳;卢鸿丰;邹艺琳设计研发完成,并于2025-03-26向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种探针组及其结合3D打印微流控芯片对外泌体表面特定糖蛋白唾液酸分析的方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种探针组及其结合3D打印微流控芯片对外泌体表面特定糖蛋白唾液酸分析的方法,属于生化分析技术领域。本发明基于3D打印微流控芯片结合三探针共定位信号放大策略,将核酸信号转化为荧光信号,通过直接读取荧光信号强度,实现对外泌体表面糖蛋白上的唾液酸信号的分析,这对克服现有技术中外泌体临床应用的缺陷以及限制提供了新方法,减少了样品的损耗、提高了反应的灵敏度,并且为探究不同外泌体及其亲本细胞特定糖蛋白唾液酸与疾病发展之间的可能关系,以及利用唾液酸进行肿瘤筛查和病程判断提供了可行方法。
本发明授权一种探针组及其结合3D打印微流控芯片对外泌体表面特定糖蛋白唾液酸分析的方法在权利要求书中公布了:1.一种基于3D打印微流控芯片结合探针组对外泌体表面特定糖蛋白唾液酸分析的非诊断目的的方法,其特征在于,所述探针组包括参与信号放大策略的第一探针组合和可结合到同一外泌体表面特定糖蛋白的第二探针组合; 其中,所述第一探针组合包括核苷酸序列如SEQIDNO.9所示的骨架探针、SEQIDNO.10所示的第一连接探针、SEQIDNO.11所示的第二连接探针和SEQIDNO.12所示的荧光报告探针;所述第二探针组合包括特异性识别外泌体表面特定糖蛋白的适配体探针,与所述特定糖蛋白上的唾液酸特异性识别的唾液酸转化探针和糖链转化探针; 所述特异性识别外泌体表面特定糖蛋白的适配体探针包括特异性识别PTK7、MUC1、EpCAM、HER2和PD-L1的适配体探针,核苷酸序列分别如SEQIDNO.1-5所示; 所述唾液酸转化探针的核苷酸序列如SEQIDNO.6所示,所述糖链转化探针的核苷酸序列如SEQIDNO.7所示; 所述糖链转化探针的5’端用DBCO修饰; 所述方法包括以下步骤: 将骨架探针、第一连接探针、第二连接探针预处理制备探针体系; 在包含4个圆柱形反应腔室的微流控芯片的腔室I中加入磁珠和外泌体,腔室II中加入磁珠洗涤液,腔室III中加入适配体探针、唾液酸转化探针、糖链转化探针、PBA-PEG-N3和所述探针体系,腔室IV中加入磁珠洗脱液;其中,四个腔室之间通过设置的通道供磁珠以及反应体系流通; 将所述微流控芯片震荡,获得吸附外泌体的磁珠,之后将磁铁放置在腔室I下方,将所述磁珠从水相移动到油相,再移动磁铁将所述磁珠从所述腔室I移动到腔室II,并将所述磁铁放置在所述腔室II的下方,以使所述磁珠从油相移动到水相,通过相同方式,依次将所述磁珠移动到腔室III进行扩增反应,再移动到腔室IV进行洗脱,得到洗脱液; 测定所述洗脱液的荧光强度,根据所述荧光强度分析唾液酸的含量。
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