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四川省林业科学研究院(四川省林产工业研究设计所);农业农村部成都沼气科学研究所郑渝川获国家专利权

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龙图腾网获悉四川省林业科学研究院(四川省林产工业研究设计所);农业农村部成都沼气科学研究所申请的专利一种基于LC-MSMS定量检测土壤和细菌悬液中AHLs的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119901839B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-01-27发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510085753.5,技术领域涉及:G01N30/02;该发明授权一种基于LC-MSMS定量检测土壤和细菌悬液中AHLs的方法是由郑渝川;伍佩珂;陈方方;王文国;吴斌;杨凌设计研发完成,并于2025-01-20向国家知识产权局提交的专利申请。

一种基于LC-MSMS定量检测土壤和细菌悬液中AHLs的方法在说明书摘要公布了:本发明涉及分析技术领域,公开了一种基于LC‑MSMS定量检测土壤和细菌悬液中AHLs的方法。针对现有技术存在的不足,本发明的目的在于提供一种相比现有方法,其灵敏度更高,检出限更低的AHLs检测方法。通过方法验证,该方法适用于土壤和细菌悬浊液两种基质。方法采用了分散液相萃取‑固相支持液液萃取,大幅度减少萃取时间、基质效应及有机试剂使用量。

本发明授权一种基于LC-MSMS定量检测土壤和细菌悬液中AHLs的方法在权利要求书中公布了:1.一种基于LC-MSMS定量检测土壤和细菌悬液中AHLs的方法,其特征在于,包括如下步骤: 1样品处理:将待测物顺次经提取和两次净化,得到待测液; a提取:将待测物和乙腈超声涡旋混合后,得提取物; 所述步骤a中,待测物为菌悬液或土壤;当待测物为菌悬液时,称样量为2-15g;当待测物为土壤时需先将土壤和水混合后再与乙腈混合,土壤和水的用量比为4-10g:9-12mL; b净化:将提取物冷冻后与无水硫酸镁、氯化钠和乙酸钠混合后离心取上清液,完成第一次净化;移取4-10mL上清液顺次经吹干、第一复溶、固相支持液液萃取二次净化、干燥、第二复溶和过滤,得到待测液; 所述步骤b中,提取物、无水硫酸镁、氯化钠和乙酸钠的用量比为12-35g:4-6g:1~4g:1-2g; 所述第一复溶所用试剂为甲酸水溶液,甲酸水溶液的质量分数为0.1~0.2%;第二复溶所用试剂为甲醇溶液,甲醇溶液的质量分数为20~40%; 所述固相支持液液萃取洗脱所用试剂为二乙胺的二氯甲烷溶液,二乙胺在二氯甲烷溶液中的质量分数为0.1~0.2%; 2标准品配置:将3-OH-C4-HSL、3-oxo-C6-HSL、3-OH-C8-HSL、3-oxo-C8-HSL、3-oxo-C10-HSL、3-OH-C12-HSL、3-oxo-C12-HSL、3-OH-C14-HSL配置成8种AHLs混标储备液;建立质谱方法的混标浓度为50μgL,标准曲线浓度分别为0.001~300μgL; 所述AHLs混标储备液配置时所用溶剂为土壤或细菌悬浊液经前处理所得的空白基质溶液;所述的土壤空白基质是土壤与石英砂混合物,与石英砂的比例是1:3,通过多次验证不含待测物,为土壤的空白基质; 3色谱条件和质谱条件:所述色谱条件为:色谱柱:双苯基柱;流动相A:0.05%的乙酸水溶液,其中含0.1-0.3mM甲酸铵;流动相B:0.05%的乙酸的甲醇溶液,其中含0.1-0.3mM甲酸铵;柱温为30-50℃;进样量为2-10μL;梯度洗脱条件为:初始时流动相B为20%,0-3min,流动相B由20%线性升至90%,3-8min,B保持为90%,8.1-10min,B恢复至20%;所述质谱条件为:电喷雾离子源,气帘气30-50psi,碰撞气Medium,离子化电压4500-5000V,温度450-500℃,喷雾气50-55psi,辅助加热气55-60psi,检测8种AHLs采用的母离子、子离子、去簇电压及碰撞能参数如下表 ; 4计算AHLs含量。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人四川省林业科学研究院(四川省林产工业研究设计所);农业农村部成都沼气科学研究所,其通讯地址为:610081 四川省成都市金牛区星辉西路18号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

以上内容由龙图腾AI智能生成。

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