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杭州美康盛德医学检验实验室有限公司金永楠获国家专利权

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龙图腾网获悉杭州美康盛德医学检验实验室有限公司申请的专利一种线粒体质量控制的检测方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116754443B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-01-27发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310438032.9,技术领域涉及:G01N15/01;该发明授权一种线粒体质量控制的检测方法是由金永楠;吴立山;邹继华;刘宁设计研发完成,并于2023-04-23向国家知识产权局提交的专利申请。

一种线粒体质量控制的检测方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种线粒体质量控制的检测方法,本发明涉及线粒体质量控制检测技术领域,操作步骤包括制备样品细胞悬液、荧光染料标记、心肌细胞分离、建立心肌细胞受损模型及检测线粒体膜电位情况。该线粒体质量控制的检测方法,可同时进行多参数、快速定量分析和分选,测量速度快,同时测量每个细胞的多参数特征,在进行细胞特征分析的同时可以把指定特征的细胞分离出来,以便对特定细胞做进一步培养、克隆化、观察或进行线粒体碎片化试验,利用阿霉素建立心肌细胞受损模型,采用JC‑1线粒体膜电位荧光探针检测获得的正常心肌细胞及受损的心肌细胞线粒体膜电位情况,验证这种线粒体质量控制的检测方法的检测质量。

本发明授权一种线粒体质量控制的检测方法在权利要求书中公布了:1.一种线粒体质量控制的检测方法,其特征在于,具体包括如下操作步骤: S1:制备样品细胞悬液,选取心肌样品组织立即放入预冷的组织培养液,采用医用剪将组织块剪成±1mm³的组织小块,加入适量酶消化液,在37℃恒温水浴消化20~30min,期间进行间断振荡或吹打细胞,采用完全组织块培养液终止消化,转移至300目尼龙网过滤除去组织团块,收集滤过的细胞,以500g离心力10min后去除上清液,用培养液洗涤细胞沉淀2次制成样品细胞悬液,置于培养皿中,在37℃、含5%二氧化碳的恒温培养箱中贴壁,12h后再加入适量培养液,继续前述条件培养,2天后换1次培养液,每天观察心肌细胞贴壁情况; S2:荧光染料标记,当观察到在长梭形的成纤维细胞上面分裂出小、圆、亮的细胞,将在对数生长期的心肌细胞用酶消化液制成单个细胞悬液,选定c-Kit为心肌细胞的待测表面标志,用anti-c-Kit特异性荧光染料对心肌细胞进行标记,得到染色样品细胞悬液,染色样品细胞悬液在鞘液的包被下单行排列形成样品液流束,依次通过检测区域; S3:心肌细胞分离,在流动室的喷口上方设置超高频的压电晶体,产生的振动使喷出的液流形成均匀的液滴,样品细胞中的待测细胞分散在液滴中,对液滴充以正负不同的电荷,完成心肌细胞的分离,得到纯化后活力较好的心肌细胞; S4:建立心肌细胞受损模型,基于阿霉素的心脏毒性原理,利用阿霉素建立心肌细胞受损模型; S5:检测线粒体膜电位情况,采用JC-1线粒体膜电位荧光探针检测S3中获得的正常心肌细胞及S4中受损心肌细胞的线粒体膜电位情况。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人杭州美康盛德医学检验实验室有限公司,其通讯地址为:312000 浙江省杭州市萧山区市心北路873号2层;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

以上内容由龙图腾AI智能生成。

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