江南大学李由然获国家专利权
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龙图腾网获悉江南大学申请的专利一种噬菌体重组蛋白RecT介导的地衣芽孢杆菌重组系统的构建及应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115786381B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-01-27发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211254315.X,技术领域涉及:C12N15/75;该发明授权一种噬菌体重组蛋白RecT介导的地衣芽孢杆菌重组系统的构建及应用是由李由然;石贵阳;马徐凡设计研发完成,并于2022-10-13向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种噬菌体重组蛋白RecT介导的地衣芽孢杆菌重组系统的构建及应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种噬菌体重组蛋白RecT介导的地衣芽孢杆菌重组系统的构建及应用,属于基因工程技术领域。本发明挖掘并鉴定了来源于芽孢杆菌噬菌体Bacillusphage049ML001的重组蛋白RecT,利用鼠李糖诱导启动子Prha构建了重组酶条件表达的同源重组系统。进一步通过优化重组酶的作用条件提高了该系统的重组效率。本发明首次在地衣芽孢杆菌中构建噬菌体重组蛋白介导的重组系统并实现了基因的敲除,为地衣芽孢杆菌的代谢工程改造提供了有效的技术手段。
本发明授权一种噬菌体重组蛋白RecT介导的地衣芽孢杆菌重组系统的构建及应用在权利要求书中公布了:1.氨基酸序列如SEQIDNO.2所示的重组蛋白RecT在地衣芽孢杆菌中基因编辑方面的应用,其特征在于,包括如下步骤: 1构建待敲除的靶基因的基因敲除盒;所述基因敲除盒含有靶基因上游片段、抗性基因、靶基因下游片段; 2将步骤1构建的基因敲除盒连接至位于质粒上的SEQIDNO.1所示的鼠李糖诱导型启动子Prha的上游;所述质粒含有编码所述重组蛋白RecT的基因,并由所述鼠李糖诱导型启动子Prha调控表达; 3将步骤2构建的重组质粒转化至宿主细胞中,获得重组菌; 4将步骤3获得的重组菌在含抗性基因相应抗生素的培养基中培养一段时间,加入鼠李糖诱导所述重组蛋白RecT的表达。
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