长江师范学院符勇耀获国家专利权
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龙图腾网获悉长江师范学院申请的专利一种百合非组培的幼胚发生体系及高效遗传转化方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN117016092B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-01-23发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310663878.2,技术领域涉及:A01C1/00;该发明授权一种百合非组培的幼胚发生体系及高效遗传转化方法是由符勇耀;何佳丽;戴前程;黄燕;姚茜;徐文姬设计研发完成,并于2023-06-06向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种百合非组培的幼胚发生体系及高效遗传转化方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种百合非组培的幼胚发生体系及高效遗传转化方法,该体系是将种子经过高锰酸钾消毒后置于灭菌培养皿中用无菌湿润纱布包裹在光照培养箱内培养,培育环境简易不污染,解决了百合幼胚在组织培养基上获取困难的问题。本发明基于百合幼胚作为受体材料,首次建立一种高效的农杆菌介导百合幼胚遗传转化体系,通过幼胚龄、农杆菌浓度、侵染时间和共培养时间等优化,获得了百合GUS幼胚转化效率达到74.7%,最终幼苗稳定转化率达到62.0%。该方法不仅操作简易,而且使得遗传转化实验的整个过程不依赖于组培室,不需要抗性筛选过程,大大降低了操作难度和成本,显著提高了遗传转化的效率,为百合品种改良提供了快速高效的转发方法。
本发明授权一种百合非组培的幼胚发生体系及高效遗传转化方法在权利要求书中公布了:1.一种利用百合幼胚的高效遗传转化方法,其特征在于,包括以下步骤: 1取农杆菌在YEB培养基中活化,得到活化菌液,然后将所述菌液离心收集菌体并用MS转化液体重悬菌液浓度至OD600为0.4~0.6,得到纯化农杆菌菌液,备用; 2向步骤1得到的纯化农杆菌菌液中加入AS激活菌液,放置2~4h,然后加入获得百合幼胚,在0.1MPa的负压条件下进行侵染,侵染结束后,用纯水对转化材料进行清洗,然后进行共培养,再将其恢复培养后栽置土壤里进行成苗的培养; 所述百合幼胚采用以下步骤得到:取百合种子冲洗并用高锰酸钾溶液消毒,再将消毒好的百合种子包裹在无菌湿润的纱布内并将其置于无菌培养皿中,然后将所述培养皿盖上保鲜膜后置于光照培养箱内培养,光照培养时间为12hd、光照培养温度为23±2℃,暗培养时间为12d、暗培养温度为18±2℃,培养过程保持纱布的湿润,待胚尖长至1~2mm,即得到所述百合幼胚。
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