山东齐都药业有限公司;山东齐都生物医药有限公司郑家晴获国家专利权
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龙图腾网获悉山东齐都药业有限公司;山东齐都生物医药有限公司申请的专利人脐带间充质干细胞的分离和培养方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120330137B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-01-20发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510795995.3,技术领域涉及:C12N5/0775;该发明授权人脐带间充质干细胞的分离和培养方法是由郑家晴;任传杰;巩志廷;伊梦杰;王小菲;靳能州;宋彦会;杨振强;黄国英设计研发完成,并于2025-06-16向国家知识产权局提交的专利申请。
本人脐带间充质干细胞的分离和培养方法在说明书摘要公布了:本发明属于干细胞技术领域,具体涉及人脐带间充质干细胞的分离和培养方法。本发明采用低浓度的II型胶原酶工作液从人脐带中分离间充质干细胞,缩短消化时间,降低了生产成本,减少细胞损伤。通过II型胶原酶处理后,脐带组织块变得松散,对组织块进行预培养,间充质干细胞在组织块中进行增殖富集。通过机械吹散从松散组织块中分离获得间充质干细胞并进行贴壁培养,培养时间短,细胞获得量远远超过传统贴壁方法,细胞质量符合标准要求。
本发明授权人脐带间充质干细胞的分离和培养方法在权利要求书中公布了:1.一种人脐带间充质干细胞的分离和培养方法,其特征在于,包括以下步骤: 1组织处理:将脐带剪成段,放入一次性无菌培养皿中,将脐带沿静脉剪开,去除动静脉和脐带外膜,获得华通氏胶碎片; 2胶原酶消化:将一段脐带制得的华通氏胶碎片放入无菌摇管中,加入II型胶原酶工作液,置摇床中混匀消化; 3组织块培养:消化完成后,加生理盐水冲洗液至胶原酶消化液中进行冲洗,滤网过滤,再用培养基冲洗脐带碎片,收集滤网上面的碎片,将消化得到的碎片放入细胞培养瓶,加入间充质干细胞无血清培养基培养,组织块中的间充质干细胞悬浮成集落生长; 4细胞分离培养:待松散的组织块中观察到明显的间充质干细胞后,将脐带组织消化得到的碎片放入离心管中,加入生理盐水冲洗液,将脐带碎片用移液器吹散,离心弃上清液,将间充质干细胞从组织中分离,将细胞沉淀用无血清间充质干细胞重悬,转移到细胞培养瓶培养; 5传代:收获P0代细胞,进行传代操作; 6冻存:收获P1代细胞,加入间充质干细胞冻存液,降温冻存; 步骤2所述II型胶原酶工作液的浓度为10UmL-50UmL,加入量为3mL-5mL; 步骤2所述消化的条件为在37℃的摇床中摇1h-2h; 步骤1所述将脐带剪成段,为将脐带剪成1cm-2cm长的段; 步骤1所述碎片的底面积为1mm2-9mm2。
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