广州市第一人民医院(广州消化疾病中心、广州医科大学附属市一人民医院、华南理工大学附属第二医院)周永健获国家专利权
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龙图腾网获悉广州市第一人民医院(广州消化疾病中心、广州医科大学附属市一人民医院、华南理工大学附属第二医院)申请的专利一种普拉梭菌的培养方法及保存方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN118703357B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-01-09发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202410687169.2,技术领域涉及:C12N1/20;该发明授权一种普拉梭菌的培养方法及保存方法是由周永健;陈慧婷;郝淮杰;黄琛;李艳红;杨思琪设计研发完成,并于2024-05-30向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种普拉梭菌的培养方法及保存方法在说明书摘要公布了:本发明涉及一种普拉梭菌的培养方法及保存方法,属于微生物技术领域。本发明普拉梭菌的培养方法包括以下步骤:将普拉梭菌的甘油菌接种至YCFA液体培养基中,在厌氧、35‑37℃下培养16‑19h,得到一级种子液;将上述所得一级种子液接种至YCFA液体培养基中,在厌氧、35‑37℃下静置培养7‑9h,得到二级种子液;将上述所得二级种子液接种至YCFA液体培养基中,在厌氧、35‑37℃下静置培养16‑19h,得到普拉梭菌发酵液。本发明通过将普拉梭菌在YCFA液体培养基中复苏、活化和发酵,能够有效提高普拉梭菌发酵液中的活菌数,活菌数最高可达1099CFUmL。
本发明授权一种普拉梭菌的培养方法及保存方法在权利要求书中公布了:1.一种普拉梭菌的培养方法,其特征在于,包括以下步骤: 1将普拉梭菌的甘油菌接种至YCFA液体培养基中,在厌氧、35-37℃下静置培养16-19h,得到一级种子液; 2将步骤1所得一级种子液接种至YCFA液体培养基中,在厌氧、35-37℃下静置培养7-9h,得到二级种子液; 3将步骤2所得二级种子液接种至YCFA液体培养基中,在厌氧、35-37℃下静置培养16-19h,得到普拉梭菌发酵液; 所述YCFA液体培养基包括以下组分:10gL胰蛋白胨、2.5gL酵母提取物、4.0gL碳酸氢钠、2.0gL葡萄糖、2.0gL麦芽糖、2.0gL纤维二糖、1.0gL半胱氨酸盐酸盐、150mLL矿物溶液Ⅰ、150mLL矿物溶液Ⅱ、1mgL刃天青、6.2mLL有机酸混合液、10.0mLL血红素溶液、1.0mLL维生素溶液Ⅰ、1.0mLL维生素溶液Ⅱ; 所述YCFA液体培养基中的矿物溶液Ⅰ为3.0gL的磷酸氢二钾水溶液; 所述YCFA液体培养基中的矿物溶液Ⅱ包括以下组分:3.0gL磷酸二氢钾、6.0gL硫酸铵、6.0gL氯化钠、0.6gL七水硫酸镁、0.6gL二水氯化钙; 所述YCFA液体培养基中的血红素溶液包括以下组分:2.8gL氢氧化钾、250mLL无水乙醇和1.0gL氯高铁血红素; 所述YCFA液体培养基中的有机酸混合液包括以下组分:17.0mL醋酸、6.0mL丙酸、1.0mL正戊酸、1.0mL异戊酸和1.0mL异丁酸; 所述YCFA液体培养基中的维生素溶液Ⅰ包括以下组分:0.01gL生物素、0.01gL维生素B12、0.03gL对氨基苯甲酸、0.05gL叶酸和0.15gL盐酸维生素B6; 所述YCFA液体培养基中的维生素溶液Ⅱ包括以下组分:0.05gL盐酸硫胺素和0.05gL核黄素。
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