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龙图腾网获悉重庆大学附属肿瘤医院申请的专利一种仑伐替尼的未结合浓度测定方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN117368354B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-01-09发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202311342341.2，技术领域涉及：G01N30/02；该发明授权一种仑伐替尼的未结合浓度测定方法是由唐甜甜;李丽仙;陈万一;罗鲜樟;李巧巧;张敏;曾金;李德卫设计研发完成，并于2023-10-17向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种仑伐替尼的未结合浓度测定方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种仑伐替尼的未结合浓度测定方法，其包括将标准曲线工作液和质控工作液送入液相色谱串联质谱检测系统进行检测，得到标准曲线；将血浆样本加至超滤管中，在离心力3000g条件下离心15min，收集血浆样本超滤液；取血浆样本超滤液加至空白血浆超滤液中混匀，取上清液于收集板中，将收集板送入液相色谱串联质谱检测系统进行检测，得到仑伐替尼峰面积与内标峰面积之比，然后将面积比值带入标准曲线，得到血浆样本中仑伐替尼的未结合浓度。本发明仑伐替尼的未结合浓度测定方法能对血浆中仑伐替尼的未结合浓度进行准确测定，并克服了现有技术的偏见。

本发明授权一种仑伐替尼的未结合浓度测定方法在权利要求书中公布了：1.一种仑伐替尼的未结合浓度测定方法，其特征在于：包括以下步骤： 1称取仑伐替尼标准品，用甲醇配制成质量浓度为1mgmL的标准曲线储备液和1mgmL的质控储备液；取用标准曲线储备液用乙腈稀释，配制成浓度为1ngmL、2ngmL、5ngmL、25ngmL、50ngmL、100ngmL和200ngmL的标准曲线工作液；取用质控储备液用乙腈稀释，配制成浓度为3ngmL、30ngmL和150ngmL的质控工作液； 2称取仑伐替尼-d4标准品，用甲醇配制成质量浓度为1mgmL的内标储备液，用乙腈稀释成浓度为20ngmL的内标溶液； 3取10μL浓度为1ngmL的标准曲线工作液加至90μL空白血浆超滤液中，混匀后加入100μL内标溶液，1400rpm涡旋5min后，在4℃及14000rpm条件下离心10min，取上清液100μL于收集板中；并对2ngmL、5ngmL、25ngmL、50ngmL、100ngmL和200ngmL的标准曲线工作液进行相同的处理； 取10μL浓度为3ngmL的质控工作液加至90μL空白血浆超滤液中，混匀后加入100μL内标溶液，1400rpm涡旋5min，在4℃及14000rpm条件下离心10min，取上清液100μL于收集板中；并对30ngmL和150ngmL的质控工作液进行相同的处理； 4将步骤3所述的收集板送入液相色谱串联质谱检测系统进行检测，通过对收集板上的标准曲线工作液进行检测得到以仑伐替尼峰面积与内标峰面积之比为纵坐标，仑伐替尼浓度为横坐标的标准曲线；通过对收集板上的质控工作液进行检测得到质控工作液的仑伐替尼峰面积与内标峰面积之比，用质控工作液的仑伐替尼峰面积与内标峰面积之比和质控工作液的仑伐替尼浓度去校准前述标准曲线，若满足相对标准偏差要求，则所述标准曲线合格；若不满足相对标准偏差要求，则重复步骤1-4，直至得到满足相对标准偏差要求的标准曲线； 5将200μL血浆样本加至0.5mL超滤管中，对超滤管于37°C水浴平衡30min后转移至离心机中，在37℃及离心力3000g条件下离心15min，收集血浆样本超滤液； 6取10μL血浆样本超滤液加至90μL空白血浆超滤液中，混匀后加入100μL内标溶液，1400rpm涡旋5min，在4℃及14000rpm条件下离心10min，取上清液100μL于收集板中； 7将步骤6中所述的收集板送入液相色谱串联质谱检测系统进行检测，得到仑伐替尼峰面积与内标峰面积之比；然后将面积比值带入步骤4得到的标准曲线，得到血浆样本中仑伐替尼的未结合浓度； 所述超滤管为AmiconUltra-0.5mL,UFC501096;cut-off10kDa。

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