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北京百迈客生物科技有限公司郑洪坤获国家专利权

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龙图腾网获悉北京百迈客生物科技有限公司申请的专利羧基化DNA芯片的制备方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN114480577B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-01-09发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202210138336.9,技术领域涉及:C12Q1/6806;该发明授权羧基化DNA芯片的制备方法是由郑洪坤;刘敏;张梦龙;李佳设计研发完成,并于2022-02-15向国家知识产权局提交的专利申请。

羧基化DNA芯片的制备方法在说明书摘要公布了:本发明提供一种羧基化DNA芯片的制备方法,本发明以普通玻片为载体,在玻片表面进行羧基化修饰后,可通过共价键引入氨基寡核苷酸链,从而达到后续DNA捕获的目的。与传统的合成工艺相比,本发明制备的羧基修饰芯片基片具有荧光背景低,信号强度大,固定效率高,制造成本低,步骤简单易行等优点。易于产业化和流程化,可广泛应用于各类DNA芯片上。

本发明授权羧基化DNA芯片的制备方法在权利要求书中公布了:1.羧基化DNA芯片的制备方法,其特征在于,包括以下步骤: 1玻片清洗; 2玻片表面硅烷化修饰; 3玻片表面羧基化修饰; 4将步骤3得到的羧基化玻片置于EDC和NHS混合溶液中,进行活化羧基反应; 5将步骤4所得活化后的玻片放入氨基修饰的寡核苷酸链溶液中,进行缩合反应,即得羧基化DNA芯片; 步骤2中使用硅烷化试剂3-氨丙基三乙氧基硅烷对玻片进行处理,得到硅烷化玻片; 步骤3中将硅烷化玻片洗净后放入30-60ml去离子水和250-500μl聚丙烯酸的混合液中,并用盐酸调pH8.0,进行羧基化反应,得到羧基化玻片; 步骤2包括: 1将49ml90%-98%乙醇和1-3ml3-氨丙基三乙氧基硅烷于烧杯中混匀,倒入装有玻片的培养皿中,用保鲜膜将培养皿密封,避光,置于脱色摇床上50-150rpm室温振荡30分钟;取出玻片,用去离子水冲洗玻片6-8次,氮气吹干; 2将玻片放入盛有90%-98%乙醇的培养皿内,50-150rpm振荡清洗10-30分钟;然后取出玻片放入盛有去离子水的培养皿内,50-150rpm振荡清洗5-15分钟;取出玻片,用去离子水冲洗6-8次,氮气吹干后,将玻片置于烘箱内120℃烘烤50-90分钟;最后将玻片从烘箱中取出避光放置,冷却至室温,即得硅烷化玻片; 步骤3包括: 1将硅烷化玻片放入培养皿内,取60ml去离子水和500μl聚丙烯酸混匀,用2M盐酸调pH至8.0后倒入装有玻片的培养皿内,用保鲜膜将培养皿密封,避光,置于脱色摇床上50-150rpm室温振荡20-40分钟; 2取出玻片,用去离子水冲洗6-8次,然后氮气吹干,得到羧基化玻片; 步骤4包括:配制EDC和NHS混合溶液,将羧基化玻片放入所述混合溶液中,于室温1000-2000rpm振荡反应30min,完成玻片的活化; EDC和NHS混合溶液的配制如下:将1.09mgEDC和0.65mgNHS溶于0.1MMES100ul中,即得; 步骤5包括:将活化后的玻片放入用0.1MMES配制的终浓度为50μM的氨基修饰的寡核苷酸链溶液中,于室温2000rpm振荡反应过夜;反应完成后用无酶水洗3次,浸泡于0.5%的BSA中15-30min,即得羧基化DNA芯片。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人北京百迈客生物科技有限公司,其通讯地址为:101300 北京市顺义区南法信镇顺平路南法信段9号院1幢6层605A;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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