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龙图腾网获悉中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院;中国人民解放军陆军第九五八医院申请的专利一种基于ChR2和GCaMP5G双转染hESC构建起搏细胞制备视网膜类器官的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN120905148B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-01-06发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202511445659.2，技术领域涉及：C12N5/079；该发明授权一种基于ChR2和GCaMP5G双转染hESC构建起搏细胞制备视网膜类器官的方法是由何翔宇;刘勇;张静媛;赵赫;黎其友;任榜其;刘珏君;陈曦设计研发完成，并于2025-10-11向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种基于ChR2和GCaMP5G双转染hESC构建起搏细胞制备视网膜类器官的方法在说明书摘要公布了：本发明涉及类器官制备技术领域，公开了一种基于ChR2和GCaMP5G双转染hESC构建起搏细胞制备视网膜类器官的方法，包括如下步骤：步骤一、转染：在hESC中转染ChR2和GCaMP5G；步骤二、筛选：通过FASC筛选ChR2和GCaMP5G双阳性细胞；步骤三、分化培养：将二维ChR2和GCaMP5G双阳性的hESC分化培养为三维的视网膜类器官；步骤四、光刺激：用470nm蓝光激活ChR2，在双光子显微镜下观察钙信号。本方案通过在hESC中转染ChR2和GCaMP5G，并筛选ChR2和GCaMP5G双阳性细胞后将其培养为视网膜类器官，通过特定的蓝光刺激类器官，有效加快hESC分化培养为三维的视网膜类器官的速度，从而有效提升视网膜类器官制备速度，缩短周期。

本发明授权一种基于ChR2和GCaMP5G双转染hESC构建起搏细胞制备视网膜类器官的方法在权利要求书中公布了：1.一种基于ChR2和GCaMP5G双转染hESC构建起搏细胞制备视网膜类器官的方法，其特征在于：包括如下步骤： 步骤一、转染：在hESC中转染ChR2和GCaMP5G； 步骤二、筛选：通过FASC筛选ChR2和GCaMP5G双阳性细胞； 步骤三、分化培养：将二维ChR2和GCaMP5G双阳性的hESC分化培养为三维的视网膜类器官；分化培养包括如下步骤： C1、将双阳性细胞悬液解离为单细胞悬液，离心后以含有DNase_I和Y-27632的视网膜分化培养基重悬细胞沉淀，获得细胞悬液； C2、在第0天，向低细胞粘附的v底96孔板的每孔添加C1中细胞悬液进行培养； C3、在第6天，用含有1.5nM的BMP4的新鲜视网膜分化培养基替换培养基后继续培养，并每三天更换一半的培养基，持续培养获得拟胚体hERO； C4、在第18天，将C3培养所得hERO移至培养皿中，在长期培养基中继续培养直到神经视网膜结构出现，获得视网膜类器官ROs； C5、将C4中所得ROs在长期诱导培养基中继续诱导分化至70天； 步骤四、光刺激：在分化培养70天时，使用470nm蓝光对培养所得ROs持续刺激50h，频率为每25秒1次，每次刺激包括频率为100HZ、时长为3ms、光强为1mWmm2的5个光脉冲。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术，可联系本专利的申请人或专利权人中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院;中国人民解放军陆军第九五八医院，其通讯地址为：400038 重庆市沙坪坝区高滩岩正街30号；或者联系龙图腾网官方客服，联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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