中国科学院西双版纳热带植物园;中威航空材料有限公司唐明勇获国家专利权
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龙图腾网获悉中国科学院西双版纳热带植物园;中威航空材料有限公司申请的专利一种农杆菌介导的轻木遗传转化方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119842780B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-01-06发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411923154.8,技术领域涉及:C12N15/82;该发明授权一种农杆菌介导的轻木遗传转化方法是由唐明勇;范爱荣;朱万先;王益加;李尧;白雪设计研发完成,并于2024-12-25向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种农杆菌介导的轻木遗传转化方法在说明书摘要公布了:本申请是关于一种农杆菌介导的轻木遗传转化方法。该方法包括:将农杆菌菌液制备得到侵染液;将轻木种子萌发成幼苗后离体子叶或茎段作为外植体,采用侵染液对轻木子叶或茎段进行侵染,侵染完成后进行共培养、恢复培养和筛选培养得到转基因毛状根或转基因愈伤组织。本申请提供的方案,能够实现轻木根的的稳定转化实现功能基因的验证和以活体的形式长久存在,并提高了轻木的遗传转化效率。
本发明授权一种农杆菌介导的轻木遗传转化方法在权利要求书中公布了:1.一种农杆菌介导的轻木遗传转化方法,其特征在于, 使用含有目标基因的pOCA30载体的菌液制备得到的侵染液对轻木外植体进行侵染,侵染完成后将侵染后的轻木外植体接种至共培养基中进行共培养;所述菌液为发根农杆菌K599菌液;所述目标基因为RUBY或JcFT基因;侵染时间为20min;共培养阶段为暗培养,共培养时间为3d; 所述轻木外植体为子叶或茎段;所述菌液OD600为0.4-0.8,所述共培养基为MS+0.2mgLNAA+0.1mgL6-BA或12MS+0.2mgLNAA+0.1mgL6-BA; 所述轻木外植体的制备方法为:筛选饱满轻木种子经1.0%次氯酸钠消毒15分钟后,无菌水漂洗三次,55℃水浴加热30分钟后,接种于12MS培养基萌发30天,取出幼苗分离无菌子叶和茎段通过5mgL木聚糖酶预处理30min后得到轻木外植体; 共培养后的轻木子叶或茎段经恢复培养和筛选培养得到转基因毛状根,转基因毛状根经诱导培养得到转基因愈伤组织; 所述恢复培养中培养基为12MS+0.1mgL6-BA+0.2mgLNAA+0.1mgLIBA+300mgLCef+200mgLTim;所述筛选培养中培养基均为MS+0.1mgL6-BA+0.2mgLNAA+0.1mgLIBA+300mgLCef+200mgLTim+20.0mgL卡那霉素;所述诱导培养中培养基为MS+0.5mgL6-BA+0.1mgLNAA+1gL矮壮素。
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