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龙图腾网获悉西北农林科技大学申请的专利一种提高乳腺上皮细胞系传代次数的方法及其应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119876039B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-01-02发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202510085252.7，技术领域涉及：C12N5/10；该发明授权一种提高乳腺上皮细胞系传代次数的方法及其应用是由刘军;唐姣美;周群莉;张涌;祝振亮;韩静设计研发完成，并于2025-01-20向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种提高乳腺上皮细胞系传代次数的方法及其应用在说明书摘要公布了：本发明公开了一种提高乳腺上皮细胞系传代次数的方法及其应用，属于乳腺上皮细胞系技术领域。本发明首次发现将绝缘子‑支架附着区外源性片段HS4‑SAR片段，与p‑Ef1a‑SV40LT‑Puro载体或pEF1a‑eGFP载体连接，转染商业化的永生化细胞系和原代细胞系，均可以显著提高乳腺上皮细胞系的传代次数，传代120代细胞形态仍然正常、未恶性转化、基因表达水平仍然未出现降低的现象，实现了永生化；建成的奶山羊乳腺上皮细胞系仍然具有合成和分泌蛋白的能力；提供的提高乳腺上皮细胞系传代次数的方法，简单易操作，对永生化细胞系和原代细胞系均具有显著的效果，有望提高多种乳腺上皮细胞系的稳定传代的传代次数，降低相关研究的细胞成本。

本发明授权一种提高乳腺上皮细胞系传代次数的方法及其应用在权利要求书中公布了：1.一种提高乳腺上皮细胞系传代次数的方法，其特征在于，将重组载体p-Ef1a-SV40LT-Puro-HS4包裹慢病毒后获得慢病毒颗粒，采用慢病毒颗粒对乳腺上皮细胞进行感染，向培养液中加入1μgmLPuromycin筛选7-10天，直到在细胞培养皿中能观察到针尖大小的细胞克隆，即获得阳性细胞，对阳性细胞进行常规培养传代即可； 重组载体p-Ef1a-SV40LT-Puro-HS4的构建方法为： S1、以Ef1a_LargeT-antigen_Puro为骨架载体，采用NheI酶切，电泳后胶回收11672bp的目的片段，命名为p-Ef1a-SV40LT-Puro； S2、以公司合成的T-HS4-SAR为模板，以HS4-SAR-F和HS4-SAR-R为引物进行PCR扩增，将扩增产物电泳后胶回收目的片段； S3、将S1获得的p-Ef1a-SV40LT-Puro和S2中获得的胶回收产物，采用同源重组试剂盒连接，得重组载体，命名为p-Ef1a-SV40LT-Puro-HS4； HS4-SAR-F序列如SEQIDNO.13所示；HS4-SAR-R序列如SEQIDNO.14所示； HS4-SAR片段的序列如SEQIDNO.2所示。

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