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龙图腾网获悉华东师范大学申请的专利一种点击化学耦合生物传感的抗生素抗性基因检测方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119753095B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-01-02发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202510015259.1，技术领域涉及：C12Q1/6825；该发明授权一种点击化学耦合生物传感的抗生素抗性基因检测方法是由徐娟;王维康;地力努·地力夏提;张薇设计研发完成，并于2025-01-06向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种点击化学耦合生物传感的抗生素抗性基因检测方法在说明书摘要公布了：本发明提供了一种点击化学耦合生物传感的抗生素抗性基因检测方法，能够实现水中抗性基因ARG的飞摩尔级别识别检测。首先将捕获DNA固定于多通道生物干涉仪的链霉亲和素生物传感器表面，在目标ARG存在的情况下，捕获DNA和信号DNA杂交到目标ARG的相邻位置，从而形成“点击”结构。之后，用辣根过氧化物酶标记带有“点击”结构的生物传感器，并浸没在二氨基联苯胺底物中，形成不溶性晶体沉积在生物传感器表面，导致传感器尖端生物层厚度变化，由此引发的波长偏移和目标ARG浓度得到的线性关系来定量检测待测样品中的抗性基因。该方法实现了水环境中抗性基因的超灵敏、高选择性检测。

本发明授权一种点击化学耦合生物传感的抗生素抗性基因检测方法在权利要求书中公布了：1.一种点击化学耦合生物传感的检测水环境介质中抗生素抗性基因的方法，其特征在于，所述方法包括以下具体步骤： 步骤1：设计两种DNA探针来进行点击化学介导的连锁反应，首先构建碱基数为13bp的捕获DNA和13bp的信号DNA；捕获DNA：在其3’端标记为叠氮化物N3，在其5’端标记为生物素Biotin；信号DNA：在其5’端标记有二苯并环辛基DBCO，在其3’端标记有生物素；目标抗性基因ARG选自四环素或磺胺类药物抗性基因tetA、tetC、tetG、tetM或sul1； 步骤2：将步骤1中构建的捕获DNA固定于多通道生物干涉仪的链霉亲和素传感器表面，得到了固定有捕获DNA的链霉亲和素传感器；捕获DNA浓度为250-1000nM，固定时间为200-500s； 步骤3：将步骤2构建的固定有捕获DNA的链霉亲和素传感器浸泡在脱脂奶粉溶液中，封闭链霉亲和素传感器上尚未发生结合的亲和素位点；脱脂奶粉浓度为1%-5%，封闭时间为60-120s； 步骤4：将步骤3经脱脂奶粉封闭后的链霉亲和素传感器浸入PBS磷酸盐缓冲溶液中平衡，获得稳定基线；PBS磷酸盐缓冲溶液pH：7.0-7.5，稳定时间为60-120s； 步骤5：将步骤4中的平衡后的链霉亲和素传感器浸泡在含有不同浓度或类型抗性基因的分析溶液中；所述抗性基因选自tetA、tetC、tetG、tetM或sul1，浓度为1fM-1nM，浸泡时间为200-500s； 步骤6：将步骤5中的结合抗性基因后的链霉亲和素传感器浸泡在含有所述信号DNA的缓冲溶液中，在目标抗性基因存在的情况下，捕获DNA和信号DNA杂交到目标抗性基因同一条链上的相邻位置，使叠氮化物N3和DBCO基团靠近形成三唑键，从而产生“点击”结构；含有信号DNA的缓冲溶液浓度为5-10nM，结合时间为200-300s； 步骤7：将步骤6中产生“点击”结构的链霉亲和素传感器浸泡在含有辣根过氧化物酶标记亲和素的缓冲液中，用辣根过氧化物酶标记“点击”结构；含有辣根过氧化物酶标记亲和素的缓冲液浓度为1-5ngmg；标记时间为200-300s； 步骤8：将步骤7用辣根过氧化物酶标记“点击”结构的链霉亲和素传感器浸泡二氨基联苯胺底物中进行信号放大；信号放大时间为300-600s；反应后形成的不溶性晶体沉淀在链霉亲和素传感器表面，导致传感器尖端生物层厚度变化，由此引发的波长偏移和目标抗性基因浓度得到的线性关系来定量检测待测样品中的抗性基因浓度。

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