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龙图腾网获悉宁波卫生职业技术学院申请的专利一种基于抗原-抗体作用的胆碱乙酰转移酶双模式分析方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116381218B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-01-02发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310425540.3，技术领域涉及：G01N33/533；该发明授权一种基于抗原-抗体作用的胆碱乙酰转移酶双模式分析方法是由吴迪;岑叶平;黄金银;江玲丽设计研发完成，并于2023-04-06向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种基于抗原-抗体作用的胆碱乙酰转移酶双模式分析方法在说明书摘要公布了：本发明专利创建了一种双模式检测方法，涉及到荧光技术及电化学技术。首先，在一定距离内，原位生长的金簇@共价框架纳米材料Au@COF可淬灭scGFP在506nm的荧光强度，而ChAT可成为这一桥梁，拉近它们之间的距离，促进荧光强度的淬灭效率，从而通过荧光强度的前后变化来讨论ChAT的含量；其次，由于静电吸引作用，scGFP和GO可以较好地结合在一起，修饰了ChAT抗体的上述材料能够较好地修饰到电极表面，当加入一定量的ChAT，可以将修饰了ChAT抗体的Au@COF进一步固定到电极表面，该电极对H2O2具有较好的电化学响应，这种双模式方法为今后进一步研究细胞中低浓度的ChAT分析监测提供了基础理论和检验方法。目前为止，尚未发现基于抗原‑抗体作用的胆碱乙酰转移酶双模式分析方法及应用的相关报导。

本发明授权一种基于抗原-抗体作用的胆碱乙酰转移酶双模式分析方法在权利要求书中公布了：1.一种非疾病诊断和治疗目的的基于抗原-抗体作用的胆碱乙酰转移酶双模式分析方法，其特征在于，具体步骤如下： 1Au@COF合成 A.取2,4,6-三4-醛基苯基三嗪、三4-氨基苯基胺、二氯苯和正丁醇混合置于圆底烧瓶中，搅拌2～10min后加入0.1～0.2mL乙酸，在氮气氛围下室温搅拌12～72h；反应结束后过滤出沉淀物，并分别用四氢呋喃、甲醇和丙酮索氏萃取；在80～120℃下真空干燥过夜后，得到黄色COF粉末； B.再将上述COF粉末悬浮于100～250μM的HAuCl4水溶液中并在冰浴中剧烈搅拌，随后逐滴加入0.1～1mL0.005～0.01M的NaBH4水溶液，继续搅拌5～10min，通过离心、水和乙醇洗涤、真空干燥得到最终产物Au@COF纳米材料；在1～2mg该纳米材料中加入0.1～1mL二甲基亚砜，混匀后，再加入0.1～1mL二次蒸馏水，分散为0.2～1mgmL的溶液，备用； C.取200～500μL20～100μgmL的胆碱乙酰转移酶抗体Ab1和500～1500μL0.2～1mgmLAu@COF混合，于30～37℃孵育20～180min，标记为Ab1-Au@COF； 2胆碱乙酰转移酶分析传感方法及应用 A.取200～500μL50～100μgmL的胆碱乙酰转移酶抗体Ab2和500～1500μL100～500nMscGFP混合，于30～37℃孵育50～180min，标记为Ab2-scGFP； B1.荧光方法——取2～10μL步骤1C中Abl-Au@COF溶液和2～10μL步骤2A中Ab2-scGFP，10～50μL0.01～0.05MPBS，2～20μL超纯水，再加入5～10μL200～1000mUmLChAT，于32～37℃孵育5～10min；置于荧光仪中测量波长范围430～650nm的荧光强度； B2.电化学方法——将裸玻碳电极GCE清洗干净，再将1～2μL步骤2A中Ab2-scGFP、1～2μL0.2～1mgmL的石墨烯GO和2～6μL0.1～0.2wt％壳聚糖混合后于30～37℃孵育2～10min，再滴入GCE表面于30～37℃孵育2～10min，用0.05MPBS缓缓清洗电极；再取1～5μL200～1000mUmLChAT滴入上述电极表面，于30～37℃静置5～10min后，不清洗状态下再加入1～5μL步骤1C中Ab1-Au@COF溶液，于30～37℃孵育额外的10～20min；随后再置于含有5mMH2O2的0.05MPBS中进行电化学检测，电位范围为-1.2～0V；另外，将1～2μL0.1～1mgmL的石墨烯GO、2～6μL0.2wt％壳聚糖、1～2μL超纯水混合后于30～37℃孵育5～10min，再滴入GCE表面于25～37℃孵育5～10min，用0.05MPBS缓缓清洗电极，制备电极1作为对比。

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