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江苏大学王坤获国家专利权

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龙图腾网获悉江苏大学申请的专利一种基于原位扩增的非洲猪瘟病毒的可抛式电化学传感器的制备方法及其用途获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116042914B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-01-02发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211155152.X,技术领域涉及:C12Q1/70;该发明授权一种基于原位扩增的非洲猪瘟病毒的可抛式电化学传感器的制备方法及其用途是由王坤;袁瑞霜;马寒玉;洪红红;肖利亭设计研发完成,并于2022-09-22向国家知识产权局提交的专利申请。

一种基于原位扩增的非洲猪瘟病毒的可抛式电化学传感器的制备方法及其用途在说明书摘要公布了:本发明属于猪传染性病毒检测领域,公开了一种基于原位环介导等温扩增LAMP的非洲猪瘟病毒ASFV的可抛式电化学传感器的制备方法及其用途。利用电化学工作站收集电流信号,为ASFV的诊断提供了简单、经济、高效的方法。步骤如下:步骤1、构建微型池;步骤2、制备修饰电极;步骤3、基于环介导等温扩增技术构建检测ASFV的电化学生物传感器;步骤4、电化学检测ASFV。本发明构建的基于LAMP策略的电化学生物传感器,将LAMP与电化学检测相结合来代替传统的荧光传感检测方案,使整个检测系统小型化和简单化。另外,本发明的电化学检测方法以电流值作为信号输出,性能稳定,实现了ASFV的灵敏检测,同时在丝网印刷电极上电沉积金纳米粒子,进一步提高了检测的灵敏检测。

本发明授权一种基于原位扩增的非洲猪瘟病毒的可抛式电化学传感器的制备方法及其用途在权利要求书中公布了:1.一种基于原位扩增的非洲猪瘟病毒的可抛式电化学传感器的制备方法,其特征在于,包括如下步骤: 步骤1、电极预处理: 在含有H2SO4和KCl的溶液中对丝网印刷碳电极SPCE进行清洗,进行循环伏安扫描,得到稳定的循环伏安曲线后,用二次水淋洗,氮气吹干,备用; 丝网印刷碳电极SPCE表面设有中心电极区域和外围非电极区域;电极区域包含一个碳工作电极、一个碳辅助电极和一个AgAgCl参比电极; 其中,含有H2SO4和KCl的溶液中,H2SO4的浓度为0.5M,KCl的浓度为0.1M;含有H2SO4和KCl的溶液用量为5mL;循环伏安扫描的范围设定为-0.2~1.5V,扫描速率为100mVs;碳工作电极的直径为3mm; 步骤2、构建微型池: 在步骤1预处理过的SPCE的非电极区域覆盖一层聚二甲基硅氧烷PDMS膜,形成微型池;其中,聚二甲基硅氧烷PDMS膜的厚度为3-5mm; 步骤3、制备修饰电极: 在步骤2中SPCE的电极区域中碳工作电极上电沉积金纳米颗粒AuNPs,制得AuNPs修饰的SPCE工作电极,记为AuNPsSPCE; 步骤4、电化学生物传感的构建: 将引物混合溶液滴在AuNPsSPCE电极表面,反应一段时间后,用PBS淋洗以除去过量的未结合的引物,最终得到带有引物的电极,记为PrimerAuNPsSPCE; 其中,采用引物V5在线软件设计ASFVp54基因的4个引物:巯基修饰的正向内引物SH-FIP,反向内引物BIP,正向外引物F3和反向外引物B3;4条引物的序列分别为: SH-FIP:SH-TGCTGGTCTGTTTGTTGCCGGGGAGCGACTACAGCAAGTG; BIP:AGACTAGTCATGGCAACTGGCGCGGATGAGCAGGAGCACT; F3:TCCACAACCAGGTACCTCTA; B3:AGTGACTGTCGTGTAAGGCT; 步骤5、ASFV的原位LAMP: 将核酸扩增反应液和ASFV标准样品混合均匀后滴于步骤4中制备好的PrimerAuNPsSPCE电极表面,然后将电极置于加热器孵育一段时间后,得到用巯基连接的扩增产物dsDNAAuNPsSPCE,构成基于原位扩增的非洲猪瘟病毒的可抛式电化学传感器。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人江苏大学,其通讯地址为:212013 江苏省镇江市京口区学府路301号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

以上内容由龙图腾AI智能生成。

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