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龙图腾网获悉中国人民解放军军事科学院军事医学研究院申请的专利一种基于液滴数字PCR快速检测五种烈性病原菌的引物探针组合及其应用方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN114891902B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-01-02发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202210408797.3，技术领域涉及：C12Q1/689；该发明授权一种基于液滴数字PCR快速检测五种烈性病原菌的引物探针组合及其应用方法是由赵勇;杜奕溥;宋亚军;谭亚芳;闫子恒设计研发完成，并于2022-04-19向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种基于液滴数字PCR快速检测五种烈性病原菌的引物探针组合及其应用方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种基于液滴数字PCR快速检测五种烈性病原菌的引物探针组合及其应用方法。所述引物探针组合包括五对引物对和相应的六条探针；其中一种病原菌采用两条不同荧光标记的探针检测，另外四种病原菌分别用一条单色荧光标记的探针检测，即可在数字PCR二维散点图上分析五种不同靶标烈性细菌基因的扩增情况。实验证明，所述引物探针组合能够特异性地扩增与检测鼠疫菌、炭疽菌、布鲁氏菌、类鼻疽菌和土拉菌五种烈性病原体，实现五靶标联检，而各引物对之间不会发生交叉反应，而且对于每种靶标都具有较高的检测灵敏度；同时，五靶标联检能够有效减少样本用量、缩短检测时间，从而有效提升烈性病原体的检测效率。

本发明授权一种基于液滴数字PCR快速检测五种烈性病原菌的引物探针组合及其应用方法在权利要求书中公布了：1.基于液滴数字PCR检测或辅助检测病原菌的组合物，所述组合物由多重PCR引物对和探针组合物组成； 所述多重PCR引物对由引物对A、引物对B、引物对C、引物对D和引物对E组成； 所述探针组合物由探针A-T1和A-T2、探针B-T、探针C-T、探针D-T和探针E-T组成，其中，所述探针的5’端核苷酸上标记荧光基团，所述探针序列的3’端核苷酸上标记淬灭基团，所述探针A-T1和探针A-T2的5’端核苷酸上标记有不同的荧光基团； 所述引物对A和所述探针A-T1和A-T2用于检测炭疽芽孢杆菌；所述引物对B和所述探针B-T用于检测类鼻疽伯克霍尔德菌；所述引物对C和所述探针C-T用于检测鼠疫耶尔森氏菌；所述引物对D和所述探针D-T用于检测布鲁氏菌；所述引物对E和所述探针E-T用于检测土拉弗朗西斯菌； 每条引物的浓度为900nM；所述探针A-T1和A-T2的浓度分别为250nM；所述探针B-T的浓度为250nM；所述探针C-T的浓度为500nM；所述探针D-T的浓度为500nM；所述探针E-T的浓度为750nM； 所述引物对A为由序列表中序列1所示的单链DNA和序列2所示的单链DNA组成的引物对；所述引物对B为由序列表中序列3所示的单链DNA和序列4所示的单链DNA组成的引物对；所述引物对C为由序列表中序列5所示的单链DNA和序列6所示的单链DNA组成的引物对；所述引物对D为由序列表中序列7所示的单链DNA和序列8所示的单链DNA组成的引物对；所述引物对E为由序列表中序列9所示的单链DNA和序列10所示的单链DNA组成的引物对； 所述探针A-T1的核苷酸序列为序列表中序列11；所述探针A-T2的核苷酸序列为序列表中序列12；所述探针B-T的核苷酸序列为序列表中序列13；所述探针C-T的核苷酸序列为序列表中序列14；所述探针D-T的核苷酸序列为序列表中序列15；所述探针E-T的核苷酸序列为序列表中序列16。

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