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龙图腾网获悉国科明耀(山东)医学科技有限公司申请的专利一种简便、低成本体外培养犬NK细胞的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN120843426B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-30发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202511366762.8，技术领域涉及：C12N5/0783；该发明授权一种简便、低成本体外培养犬NK细胞的方法是由刘靖;宋益哲设计研发完成，并于2025-09-24向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种简便、低成本体外培养犬NK细胞的方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种简便、低成本体外培养犬NK细胞的方法，属于细胞培养技术领域。该方法包括以下步骤：从犬的外周血中分离NK细胞，用犬NK细胞激活培养基培养24‑48h，然后用犬NK细胞扩增培养基继续培养，48h后补加犬NK细胞扩增培养基，细胞明显扩增则进行扩瓶，否则离心后维持原瓶培养，后续每隔2天补液并扩瓶或原瓶培养，12‑18天后收获犬NK细胞。本发明提供的方法整个过程不再需要工程化滋养细胞和多细胞因子对犬NK细胞进行活化处理，也不需要抗体包被激活，操作简便、成本较低，并且培养得到的犬NK细胞正常表达NKp46，不表达CD3和CD5，有正常的抑制和杀伤肿瘤的能力。

本发明授权一种简便、低成本体外培养犬NK细胞的方法在权利要求书中公布了：1.一种简便、低成本体外培养犬NK细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤： 1从犬的外周血中分离NK细胞，用新鲜配制的犬NK细胞激活培养基重悬，然后接种至培养瓶中，再添加新鲜配制的犬NK细胞激活培养基，前后左右晃动，然后放入37℃、5%CO2培养箱中培养24h-48h； 2激活培养结束后，沿培养瓶的侧壁缓慢补加新鲜配制的犬NK细胞扩增培养基，然后放入37℃、5%CO2培养箱中培养48h，取样计数，补加新鲜配制的犬NK细胞扩增培养基，若细胞明显扩增，则进行扩瓶或转入细胞培养袋培养，若细胞无明显扩增，则将细胞离心后维持原瓶培养，后续每隔2天取样计数补液，若细胞明显扩增，则进行扩瓶或转入细胞培养袋培养，若细胞无明显扩增，则将细胞离心后维持原瓶培养，扩增培养12天-18天后收获犬NK细胞； 其中，犬NK细胞激活培养基的配制方法如下：以PRMI1640为基础培养基，添加重组人源IL2、重组人源IL-15、地西他滨和胎牛血清，浓度分别为100IUmL、1000UmL、10nM-20nM、10%； 犬NK细胞扩增培养基的配制方法如下：以PRMI1640为基础培养基，添加重组人源IL-15和胎牛血清，浓度分别为2000UmL、10%。

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