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龙图腾网获悉河南大学申请的专利一种木本双子叶植物根系石蜡切片的制备方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116659992B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-30发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310683353.5，技术领域涉及：G01N1/28；该发明授权一种木本双子叶植物根系石蜡切片的制备方法是由李文娆;贺梦月;惠雪;钱舒凡;王路伟设计研发完成，并于2023-06-09向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种木本双子叶植物根系石蜡切片的制备方法在说明书摘要公布了：本发明属于石蜡切片技术领域，具体涉及一种木本双子叶植物根系石蜡切片的制备方法。本发明提供的木本双子叶植物根系石蜡切片的制备方法，依次包括以下步骤：固定、取样、脱水与预染色、二级透明、浸蜡、包埋、修块、粘固、切片、展片与粘片、脱蜡、复水、染色、脱水、透明。本发明的制备方法各步骤紧密配合，前后衔接，缩短制片时间的同时，还能够显著提高根系组织制片成功率，制作的切片完整、清晰、易于观察，能够有效解决现有技术中植物根系不同发育程度，且区域结构差异较大难以制片的技术难题。

本发明授权一种木本双子叶植物根系石蜡切片的制备方法在权利要求书中公布了：1.一种木本双子叶植物根系石蜡切片的制备方法，其特征在于，依次包括以下步骤：固定、取样、脱水与预染色、二级透明、浸蜡、包埋、修块、粘固、切片、展片与粘片、脱蜡、复水、染色、脱水、透明； 所述固定、取样为：将木本双子叶植物根系置于甲醛-冰醋酸-乙醇溶液中进行固定，完成之后进行取样； 所述脱水与预染色为：对取样后的根系样品依次进行70%乙醇处理、85%乙醇+番红处理、90%乙醇处理、95%乙醇处理、100%乙醇处理、100%乙醇处理，完成脱水与预染色处理；所述85%乙醇+番红处理的时间为2h；所述番红在85%乙醇中的浓度为1g100mL； 所述脱水与预染色中，进行70%乙醇处理、90%乙醇处理、95%乙醇处理、100%乙醇处理、100%乙醇处理的时间均为40min； 所述二级透明为：将脱水与预染色后的根系样品先用无水乙醇与二甲苯的混合液浸泡预处理，然后采用二甲苯浸泡，完成二级透明处理；混合液浸泡的时间为1h，采用二甲苯浸泡的次数为2次，每次浸泡的时间为1h； 所述浸蜡为：将二级透明后的根系样品先于混合蜡液中进行浸蜡处理，然后将混合蜡液置换为蜂蜡-石蜡混合液继续进行浸蜡处理；所述混合蜡液由二甲苯和石蜡屑组成； 所述浸蜡的具体过程为，第一步将透明后的根系样品与体积比为1：1的二甲苯与石蜡屑的混合蜡液组成的混合物置于63-65℃处理12h；第二步将混合蜡液置换为蜂蜡-石蜡混合液，继续浸蜡60h；将混合蜡液置换为蜂蜡-石蜡混合液进行浸蜡处理后，再采用蜂蜡-石蜡混合液置换5次；所述蜂蜡-石蜡混合液中，蜂蜡的含量为8wt%； 所述包埋为：于包埋盒中先加入部分浸蜡过程中的蜂蜡-石蜡混合液，在包埋盒表层的蜂蜡-石蜡混合液未凝固时，加入包含根系样品在内的剩余的蜂蜡-石蜡混合液，完成包埋处理；所述包埋盒的长、宽、高分别为3.8-4.2cm、2.6-3cm、0.3-0.7cm，材质为硫酸纸； 所述粘固为：将修块好的根系样品黏附于切片底座上；所述切片底座具有空心圆柱的立体结构，空心圆柱的底面内径为1.8-2.2cm，高度为0.5-1.5cm； 所述切片为：对粘固后的根系样品进行切片处理，控制切片厚度与根系样品的根系发育程度相匹配；其中，根系样品为根尖组织区时，切片厚度为11-13μm；根系样品为发育程度高的非根尖组织区时，切片厚度为15-17μm； 所述脱蜡为：将展片与粘片后的根系样品浸泡于二甲苯中25min，然后再更换新的二甲苯继续浸泡10min； 所述复水为：对脱蜡后的根系样品采用不同浓度梯度的乙醇逐级进行复水处理；所述乙醇的梯度依次为100%、90%、80%、70%、50%。

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