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龙图腾网获悉吉林大学重庆研究院申请的专利一种基于金簇-二氧化锰纳米片的农药荧光免疫分析法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116400067B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-30发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310069711.3，技术领域涉及：G01N33/53；该发明授权一种基于金簇-二氧化锰纳米片的农药荧光免疫分析法是由李红霞;吕婷;王博旭;苏长顺;胡亚楠;王荷蕊;孙春燕设计研发完成，并于2023-02-07向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种基于金簇-二氧化锰纳米片的农药荧光免疫分析法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种基于金簇‑二氧化锰纳米片的农药荧光免疫分析法。目前，开发一项灵敏度高、抗干扰能力强的分析法检测复杂食品基质中的农药仍有挑战性。在本发明中，利用包被抗原与农药竞争识别酶标抗体。经过竞争性免疫反应后，ALP催化底物产生抗坏血酸，可触发AuNCs‑MnO2NFs的分解，调节荧光反应。选择杀螟硫磷作为分析物用本方法检测。结果表明，荧光免疫分析法具有较高的检测灵敏度IC10＝5.78pgmL‑1，比传统的酶联免疫法提高了约56倍。本发明成功用于小白菜中农药残留与降解动态的精确监测，具良好抗干扰能力和重现性，为实际样品中农药残留测定铺平道路。

本发明授权一种基于金簇-二氧化锰纳米片的农药荧光免疫分析法在权利要求书中公布了：1.一种基于金簇-二氧化锰纳米片的农药荧光免疫分析法，其特征在于，其步骤如下： A.AuNCs-MnO2复合材料的制备： 取HAuCl4·4H2O和BSA在37℃静置温育10min，随后将二者按体积比1:1混合，剧烈搅拌5min后，将NaOH相比于混合溶液体积比1:20加入上述溶液中，在37℃下持续剧烈搅拌12h，将得到的黄色AuNCs溶液放入1kDa透析袋中提纯，将提纯的AuNCs溶液与超纯水按照体积比1:3.9混合，在室温下温和搅拌5min，随后，将MnCl2·4H2O相比于上述混合溶液1:98加入到溶液中，温和搅拌1h，之后，将NaOH相比于混合溶液体积比1:99加入溶液中，温和搅拌4h，得到棕色AuNCs-MnO2溶液，最后，用1kDa透析袋纯化AuNCs-MnO2溶液，纯化后的AuNCs溶液与棕色AuNCs-MnO2复合溶液需要在4℃下保存， B.碱性磷酸酶催化活性的研究： 通过碱性磷酸酶与L-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐的催化反应生成抗坏血酸，抗坏血酸还原MnO2纳米片变为Mn2+，恢复AuNCs荧光，产生荧光信号变化，对酶催化活性进行研究，将L-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐与不同浓度的ALP按体积比2:1混合，并在37℃孵育30min，然后将溶液、Tris-HCl缓冲液和AuNCs-MnO2溶液以3:1:2的比例混合，在37℃孵育10min后，将混合物与超纯水按照3:7比例混合，混合后，利用荧光分光光度计进行荧光测量， C.检测杀螟硫磷的荧光免疫分析法： 用碳酸盐缓冲液将包被抗原稀释至1μgmL-1，于96孔板上包被抗原100μL孔，4℃孵育过夜，用PBST洗涤3次后，每孔加入300μL牛血清白蛋白，37℃封闭96孔板60min，用PBST洗涤3次后，将Nb-FNT-ALP和不同浓度的FNT按照1:1的比例加入到存在包被抗原的96孔板中，37℃孵育90min后，继续用PBST冲洗3次，然后，在37℃下将超纯水和L-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐按照1:2的比例加入96孔板中，并反应30min，随后，将溶液、Tris-HCl缓冲液和AuNCs-MnO2溶液以3:1:2的比例混合，在37℃静置10min，然后，将得到的溶液移到1.5mL离心管中，并与超纯水按照3:7的比例混合，测量荧光值， D.食品实际样品中农药水平监测分析： 准备了7种样品：自来水、松花江水、苹果、大白菜、生菜、大米和番茄，来评估在实际食品样品中检测农药的能力，除水样外，均质样品加入FNT标准溶液，样品加入乙腈和水5:1混合的提取缓冲液，振摇60min后，向离心管中加入NaCl，涡旋混合物质5min，让其沉淀分离，静置30min后，从样品中提取上清液，并采用建立的荧光免疫分析方法进行检测，这之后，种植两盆小白菜，一盆作为空白对照，另一盆从种植后第8天开始，连续2天，每天喷洒1次10mLFNT标准物，末次喷洒后，待小白菜表面干燥，用前述方法从小白菜的根和叶中提取FNT，然后，监测小白菜中FNT的降解水平。

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