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龙图腾网获悉西北农林科技大学申请的专利一种山羊胚胎干细胞培养体系及建系方法和应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119432723B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-26发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202411476592.4，技术领域涉及：C12N5/0735；该发明授权一种山羊胚胎干细胞培养体系及建系方法和应用是由王小龙;金妙函;孙珂珂;沈文文;宋聖姣;寇启芳;周世卫;魏迎辉;陈玉林设计研发完成，并于2024-10-22向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种山羊胚胎干细胞培养体系及建系方法和应用在说明书摘要公布了：本发明涉及细胞生物学技术领域，具体公开了一种山羊胚胎干细胞培养体系及建系方法和应用，所述山羊胚胎干细胞培养体系以mTeSRTMPlus为基础培养液，并添加：20ngmL～25ngmL的白血病抑制因子、1μM～1.5μM的PD0325901、4μM～5μM的IWR‑1、45μgmL～50μgmL的Vc、15ngmL～20ngmL的激活素A、1～1.2μM的CGP77675、1.5～2μM的GO6983。本发明通过山羊胚胎干细胞培养体系培养获得形成清晰边缘的细胞克隆，能稳定传代，具备分化为三胚层的潜力。

本发明授权一种山羊胚胎干细胞培养体系及建系方法和应用在权利要求书中公布了：1.一种山羊胚胎干细胞建系方法，其特征在于，包括如下步骤： 饲养层细胞制备：分离小鼠胎儿成纤维细胞于小鼠胎儿成纤维细胞培养液中培养至细胞汇合度达到75%以上时，按照1：4～5的比例进行细胞传代； 待传代后小鼠胎儿成纤维细胞再次完全覆盖培养皿表面，将小鼠胎儿成纤维细胞培养液更换为含有10µgmL丝裂霉素C的小鼠胎儿成纤维细胞培养液处理细胞，处理时长为3h； 弃去含有10μgmL丝裂霉素C的小鼠胎儿成纤维细胞培养液，D-PBS润洗小鼠胎儿成纤维细胞，后使用0.25%胰酶消化小鼠胎儿成纤维细胞，获得小鼠胎儿成纤维细胞悬液； 将稀释后含有DMSO的小鼠胎儿成纤维细胞细胞悬液依次于4℃放置20min，-20℃放置40min，-80℃放置24h，随后转移至液氮中保存； 全胚接种法分离山羊胚胎干细胞：选取形态良好，内细胞团明显的山羊囊胚进行山羊胚胎干细胞体外分离，利用酸性台式液去除囊胚透明带，并利用山羊胚胎干细胞培养体系分离山羊胚胎干细胞，然后将分离得到的山羊胚胎干细胞按照1:1～3接种于饲养层细胞培养获得山羊胚胎干细胞； 所述山羊胚胎干细胞培养体系以mTeSRTMPlus为基础培养液，并添加：20ngmL～25ngmL的白血病抑制因子LIF、1µM～1.5µM的PD0325901、4µM～5µM的IWR-1、45µgmL～50µgmL的维生素C、15ngmL～20ngmL的激活素A、1～1.2µM的CGP77675、1.5～2µM的GO6983； 将获得山羊胚胎干细胞进行传代培养：山羊胚胎干细胞去原培养液，加入D-PBS轻微晃动润洗细胞； 弃去D-PBS，用Accutase消化细胞，于37℃条件下孵育3min，用gESCs培养液终止消化，离心后弃上清； 使用含终浓度为10μM～15μMY-27632的山羊胚胎干细胞培养基重悬细胞，根据细胞生长密度，按1:3～10比例进行传代； 传代每24h更换不含Y-27632的山羊胚胎干细胞培养液，待细胞汇合度达80%～90%即可进行下次传代，获得山羊胚胎干细胞系； 50mL所述含有10μgmL丝裂霉素C的小鼠胎儿成纤维细胞培养液配方为：45mLDMEM高糖培养基+5mL胎牛血清+500μL青霉素-链霉素双抗+10μgmL丝裂霉素C。

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