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龙图腾网获悉江南大学申请的专利一种评估酶促反应中脂肪酶对脂肪酸选择性的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN117095761B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-26发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310857553.8，技术领域涉及：G16C20/10；该发明授权一种评估酶促反应中脂肪酶对脂肪酸选择性的方法是由王小三;黄雅祺;李厚悦;付艺婕;王子欣;余俊文设计研发完成，并于2023-07-13向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种评估酶促反应中脂肪酶对脂肪酸选择性的方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种评估酶促酯化反应中脂肪酶对脂肪酸选择性的方法，包括搜索或构建脂肪酶和脂肪酸的3D结构，将受体脂肪酶和配体脂肪酸的3D结构进行理想化处理和对接前处理，通过分子对接软件模拟对接，得到底物‑酶的对接复合结构，使用对接可视化软件处理对接结果，综合分析不同脂肪酶和不同脂肪酸的对接结合能和氢键形成等参数，以解析脂肪酶对脂肪酸的选择性。本发明使用分子对接法评估酶促反应中脂肪酶脂肪酸的选择性，显著解决了脂肪酶筛选中实验投入大的问题，大幅提高了脂肪酶筛选与评估的效率，极大缩短了工业中最适脂肪酶的筛选时间。

本发明授权一种评估酶促反应中脂肪酶对脂肪酸选择性的方法在权利要求书中公布了：1.一种评估酶促反应中脂肪酶对脂肪酸选择性的方法，其特征在于：所述方法通过评估酶促酯化反应生产中不同脂肪酶对支链脂肪酸的选择性，用以筛选酶促酯化反应生产支链脂肪酸甘油酯的最适脂肪酶，步骤如下： S1：根据蛋白质来源、氨基酸序列和元素组成自PDB、PubChem和UniProt数据库中搜索所需脂肪酶和脂肪酸的3D结构； S2：将上述的配体和受体结构导入用于理想化处理和对接前处理的软件中，通过去水、加极性氢原子、计算电子的操作处理脂肪酶模型，并设定脂肪酸模型的扭转键，将二者作为对接的起始结构； S3：在AutodockTools中设定脂肪酶结构为刚性，脂肪酸分子为柔性，以酶的催化三联体为中心设置尺寸为40Å×40Å×40Å的网络格作为对接空间，每次生成10种对接结果，最佳和最差结合结果的最大能量差为4kcalmol，每次对接运行1~200次，选对接结果中甘油酯与脂肪酶催化三联体活性位点成功对接的结果，取其结合能平均值评估脂肪酶对不同脂肪酸的选择性； S4：分别使用对接可视化软件对分子对接结果进行3D和2D渲染、数据处理以及几何分析，可视化脂肪酸与脂肪酶活性位点中氨基酸残基间的相互作用，综合分析不同脂肪酸与脂肪酶残基结合能等指标； S5：通过对比实际实验中脂肪酶的催化实验结果，验证分子对接评估脂肪酶脂肪酸选择性的准确性，具体实验步骤为： 脂肪酸置于夹层酶反应器中，按照甘油与脂肪酸摩尔比为3:1的比例加入甘油，放入磁力搅拌子搅拌均匀，待体系温度达到70℃后分别加入5wt%的待测脂肪酶，反应12h后取出产物，4000rpm离心10min去除脂肪酶； 通过HPLC-RID检测反应产物中甘油三酯含量，HPLC-RID分析前，称取20mg反应产物，加入1mL流动相溶解样品，经0.22μm有机滤膜后通过HPLC-RID分析； 色谱条件：4.6mm×250mm×5μm，硅胶柱，柱温为30℃，流动相流速为1.0mLmin，样品质量浓度为20mgmL，进样量为20μL，流动相为体积比为15:1:0.003的正己烷异丙醇甲酸，各组分利用标准品进行定性，采用面积归一化法定量，得到最终不同酶催化所得的支链脂肪酸甘油三酯含量，筛选得到不酶对不同脂肪酸的选择性。

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