广西大学赵洋获国家专利权
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龙图腾网获悉广西大学申请的专利把体外培养的肠道共生微生物导入草地贪夜蛾体内的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116267820B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-26发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310529804.X,技术领域涉及:A01K67/34;该发明授权把体外培养的肠道共生微生物导入草地贪夜蛾体内的方法是由赵洋;杨细平;段勇设计研发完成,并于2023-05-11向国家知识产权局提交的专利申请。
本把体外培养的肠道共生微生物导入草地贪夜蛾体内的方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种把体外培养的肠道共生微生物导入草地贪夜蛾体内的方法,从草地贪夜蛾中分离、纯化、摇菌培养出菌液,对草地贪夜蛾的幼虫进行饥饿处理,将玉米叶片剪成小块,浸泡在准备好的菌液中,晾干后用其饲喂草地贪夜蛾幼虫,即可将体外培养的肠道共生微生物导入草地贪夜蛾体内。本发明的方法不需要显微注射器,并且操作简单,不需要连续饲喂多代,实验周期短;能够改变昆虫体内细菌结构,从而达到研究共生菌对昆虫生长发育等个方面的影响的目的。
本发明授权把体外培养的肠道共生微生物导入草地贪夜蛾体内的方法在权利要求书中公布了:1.一种把体外培养的肠道共生微生物导入草地贪夜蛾体内的方法,其特征在于,包括以下步骤: 步骤一,从草地贪夜蛾中分离、纯化、摇菌培养出菌液; 步骤二,对草地贪夜蛾的幼虫进行饥饿处理; 步骤三,将玉米叶片剪成小块,浸泡在步骤一准备好的菌液中,晾干后用其饲喂草地贪夜蛾幼虫,即可将体外培养的肠道共生微生物导入草地贪夜蛾体内; 步骤一中从草地贪夜蛾中分离、纯化、摇菌培养出菌液的方法为:用高效氯氰菊酯处理草地贪夜蛾,24h后对存活的草地贪夜蛾进行肠道解剖,去除肠道内容物,取干净的虫体肠道于无菌水中切碎,静置后取上清液涂在110LB固体培养基上,过夜培养,挑取单菌落产物,用110LB液体培养基进行单菌落的扩大培养,提取细菌DNA进行测序,确定菌株分类,选择要转入草地贪夜蛾体内的菌株的菌液,离心收集菌体,用无菌蒸馏水洗涤,再加入无菌蒸馏水震荡混匀,得到菌液用于后续处理; 用高效氯氰菊酯处理草地贪夜蛾的方法为:用高效氯氰菊酯浸泡玉米叶片,将玉米叶片晾干后饲喂草地贪夜蛾三龄幼虫; 过夜培养的温度为37℃,静置的时间为3min,要转入草地贪夜蛾体内的菌株为嗜麦芽窄食单胞菌; 得到OD600=1.0的菌液用于后续处理; 在步骤三中,玉米叶片为成熟期的玉米叶片,将玉米叶片剪成面积为1cm2的小块,浸泡在步骤一准备好的菌液中,浸泡时间为5s,将玉米叶片取出后静置晾干,当天用于饲喂草地贪夜蛾幼虫; 在步骤三中,饲喂草地贪夜蛾幼虫时,采用单独饲喂的方式,处理前二天每只幼虫一天饲喂1片玉米叶片小块,处理的第三天到预蛹期每只幼虫一天3-4片玉米叶片小块; 不需要连续饲喂多代,实验周期短;能够改变昆虫体内细菌结构,从而达到研究共生菌对昆虫生长发育各方面影响的目的。
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