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龙图腾网获悉中国农业科学院蔬菜花卉研究所申请的专利一种大蒜愈伤组织超低温保存的方法及超低温保存设备获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN111387058B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-19发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202010396058.8，技术领域涉及：A01H4/00；该发明授权一种大蒜愈伤组织超低温保存的方法及超低温保存设备是由王海平;刘卓雅;李锡香;宋江萍;赵青;张晓辉设计研发完成，并于2020-05-12向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种大蒜愈伤组织超低温保存的方法及超低温保存设备在说明书摘要公布了：本发明属于农产品超低温保存技术领域，公开了一种大蒜愈伤组织超低温保存的方法及超低温保存设备，取长势好的愈伤组织接进行预培养；用低温保护剂进行装载、脱水、玻璃化；低温保护剂处理后茎尖的复温；低温保护剂处理后茎尖的恢复；将恢复后的愈伤组织接入培养基进行初代培养及扩繁。通过本发明方法，有效提高大蒜组织超低温保存效果，提高了大蒜愈伤组织超低温保存后的成活率：预培养时间2天，加载介质装载时间20分钟，PVS2玻璃化溶液处理15分钟，会使愈伤组织成活率明显提高。本发明的方法可应用于大蒜愈伤组织超低温保存,其操作过程简易，易应用于生产，可用于大蒜种质资源的高效安全保存。

本发明授权一种大蒜愈伤组织超低温保存的方法及超低温保存设备在权利要求书中公布了：1.一种大蒜愈伤组织超低温保存的方法，其特征在于，所述大蒜愈伤组织超低温保存的方法包括： 步骤一、取长势好的愈伤组织进行预培养； 步骤二、对低温保护剂进行装载、脱水、玻璃化； 步骤三、低温保护剂处理后愈伤组织的复温； 步骤四、低温保护剂处理后愈伤组织的恢复； 步骤五、将恢复后的愈伤组织接入培养基进行初代培养及扩繁： 所述步骤一具体为取长势较好的愈伤组织接入在含有GamborgB5基础培养基+NAA+2iP的培养皿上，接种好的培养皿放在黑暗中，进行预培养，具体包括： 步骤1、配置含2iP和NAA的GamborgB5培养皿：所述培养皿含有GamborgB5basalmedium3.21gL、2iP0.05mgL、NAA0.01mgL、蔗糖30gL、琼脂6.5gL； 步骤2、接种：将愈伤组织接种在培养皿放在黑暗中5℃的条件下，分别进行预培养2天； 所述步骤二以PVS2作为低温保护剂进行装载、脱水、玻璃化，具体包括： 步骤S21、装载：将预培养的愈伤组织转移到加载介质的培养皿中，浸泡20~30分钟；所述加载介质的培养皿为MS2.165gL、甘油184.2gL、蔗糖205.4gL、MS-G625ml和MS-vitamins610ml；所述MS-G6溶液由硫胺素0.08gL、肌醇20gL配制；MS-vitamins6溶液由甘氨酸0.2gL、肌醇10gL、烟酸0.05gL、盐酸吡哆醇0.05gL和硫胺素0.01gL配制； 步骤S22、脱水：20~30分钟后取出愈伤组织，用0℃冷冻过的PVS2玻璃化溶液替代，将愈伤组织置于PVS2溶液中，置于冰上15~20分钟； 步骤S23、玻璃化：15~20分钟后，将4~5个愈伤组织放在无菌的箔条上；将箔条插入含有液氮的浅容器中； 所述步骤三具体包括：将箔条浸入1.2M蔗糖+12MS培养基中浸泡二十分钟，十分钟后换新的溶液，加热到愈伤组织脱落，从介质中移除箔条；二十分钟后，将组织转移到含有GamborgB5基本培养基+NAA+2iP的新培养皿中，将培养皿用铝箔包裹，放置在生长室24小时； 所述步骤四具体包括：24小时后，将组织移入含有GamborgB5基本培养基+NAA+2iP的新培养皿中，用锡纸包裹，将培养皿放置在生长室四天，然后取下箔纸，在昏暗的灯光下再放置五天，五天后，移至全光，将组织放在培养皿中，直到生长超过培养皿的空间，然后移至含有GamborgB5+NAA+2iP的培养皿中。

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