浙江师范大学行知学院尹小燕获国家专利权
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龙图腾网获悉浙江师范大学行知学院申请的专利一种从一步法制备阿莫西林的反应液中分离阿莫西林和苯乙酸的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120400293B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-16发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510556985.4,技术领域涉及:C12P37/04;该发明授权一种从一步法制备阿莫西林的反应液中分离阿莫西林和苯乙酸的方法是由尹小燕;杨忠华设计研发完成,并于2024-10-29向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种从一步法制备阿莫西林的反应液中分离阿莫西林和苯乙酸的方法在说明书摘要公布了:本发明属于酶法合成抗生素的产物分离技术领域,尤其涉及一种从一步法制备阿莫西林的反应液中分离阿莫西林和苯乙酸的方法。本申请中使用固定化的青霉素酰化酶突变体催化青霉素钾一步合成阿莫西林,针对获得的反应混合物开发了一套分离阿莫西林和苯乙酸的方法,技术方案主要包括:首先通过过滤将固定化的青霉素酰化酶突变体从反应液中分离出来,之后通过结晶将阿莫西林分离出;再之后通过甲苯萃取、反萃取等将苯乙酸结晶分离回收。该分离方法能够快速、高效分离阿莫西林,且阿莫西林产率较高,平均结晶率达93.22%;同时,苯乙酸的分离回收效果好;萃取剂甲苯可以实现循环使用。
本发明授权一种从一步法制备阿莫西林的反应液中分离阿莫西林和苯乙酸的方法在权利要求书中公布了:1.一种从一步法制备阿莫西林的反应液中分离阿莫西林和苯乙酸的方法,其特征在于:使用固定化的青霉素酰化酶突变体催化青霉素钾一步合成阿莫西林,得到反应悬浊液,对所述反应悬浊液进行分离处理,包括以下步骤: 1向反应悬浊液中加入去离子水,抽滤,得到阿莫西林滤出液和固定化青霉素酰化酶突变体的截留物; 2用去离子水洗涤截留的固定化青霉素酰化酶突变体,合并洗涤液及步骤1中的阿莫西林滤出液,获得混合液; 3用盐酸调节步骤2获得的混合液的pH至2,得到待分离混合液; 4向待分离混合液中滴加NaOH溶液至pH3.5-5.5,4℃条件下静置结晶; 5结晶完成后,过滤分离得到阿莫西林晶体和含苯乙酸的液相; 使用固定化的青霉素酰化酶突变体催化青霉素钾一步合成阿莫西林的方法包括:仅使用一种固定化的青霉素酰化酶突变体作为反应体系中的唯一一种酶,以青霉素或其盐与D-对羟基苯甘氨酸甲酯为底物,在pH4~8的缓冲体系中进行反应;所述青霉素酰化酶突变体的氨基酸序列与SEQIDNO.1所示的氨基酸序列相比,突变方式选自以下a、b、c中的一种: a:发生以下一种突变:N241βK; b:同时发生以下三种突变:F146αK、N241βK、G385βR; c:同时发生以下四种突变:F146αK、F71βY、N241βK、G385βY; SEQIDNO.1中,从蛋白质的N端到C端依次为:第27~235位为209个氨基酸组成的α亚基、第290~846位由557个氨基酸组成的β亚基;N241βK表示β亚基的第241位氨基酸由N突变为K,F146αK表示α亚基的第146位氨基酸由F突变为K,G385βR表示β亚基的第385位氨基酸由G突变为R,F71βY表示β亚基的第71位氨基酸由F突变为Y。
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