北京航空航天大学杭州创新研究院;杭州乐为生医科技有限公司高阳获国家专利权
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龙图腾网获悉北京航空航天大学杭州创新研究院;杭州乐为生医科技有限公司申请的专利一种单分子免疫检测原料及其检测方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119936386B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-16发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510096082.2,技术领域涉及:C12Q1/6804;该发明授权一种单分子免疫检测原料及其检测方法是由高阳;韩改净设计研发完成,并于2025-01-21向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种单分子免疫检测原料及其检测方法在说明书摘要公布了:本发明属于单分子免疫检测领域,公开了一种单分子免疫检测原料,包括检测抗体和捕获抗体,所述检测抗体和捕获抗体定点偶联叠氮功能基团,偶联有叠氮钠功能基团的检测抗体和捕获抗体分别与修饰有二苯并环辛炔DBCO的寡核苷酸序列1,序列如SEQIDNO.1所示和寡核苷酸序列2偶联,序列如SEQIDNO.2。本发明还公开了一种单分子免疫检测方法本发明通过单分子免疫检测原料及检测方法,即可实现飞克级生物标志物的检测。在实验室常温条件下即可完成整个检测过程,无需变温孵育,无需特制设备,可匹配常规流式细胞仪或荧光显微镜即可对结果进行判读。无需定制芯片和耗材,成本可控。应用双抗体夹心法,检测特异性更高。
本发明授权一种单分子免疫检测原料及其检测方法在权利要求书中公布了:1.一种非诊断目的的单分子免疫检测方法,包括如下步骤: 步骤1、原料制备:制备单分子免疫检测原料,所述单分子免疫检测原料,包括IL-6检测抗体和IL-6捕获抗体,所述检测抗体和捕获抗体通过二糖糖恶唑林在糖链上定点偶联叠氮功能基团,偶联有叠氮钠功能基团的检测抗体和捕获抗体分别与修饰有二苯并环辛炔的寡核苷酸序列1,序列如SEQIDNO.1所示和寡核苷酸序列2偶联,序列如SEQIDNO.2所示; 包括: 步骤1.1抗体与寡核苷酸的定点偶联; 步骤1.2偶联有寡核苷酸序列的IL-6捕获抗体包被磁珠; 步骤2、配置单分子免疫反应体系; 步骤3、连接反应体系形成滚环扩增模板 步骤4、滚环扩增进行检测信号放大 步骤5、荧光信号计数; 步骤3具体如下: 配置连接反应体系,包含连接子1和连接子2,序列分别如SEQIDNO.3和SEQIDNO.4所示,连接酶,连接酶工作缓冲液,与步骤2的磁珠室温孵育30分钟;去除孵育反应液,加洗涤缓冲液清洗; 步骤4具体如下: 配置滚环扩增反应体系,包含等温扩增酶、扩增底物dNTP、扩增反应缓冲液Mg2+以及与滚环扩增模板杂交的荧光信号探针,所述荧光信号探针的序列如SEQIDNO.5所示;室温孵育30分钟-60分钟;去除孵育反应液,加洗涤缓冲液清洗,去除洗涤缓冲液,用磁珠重悬缓冲液重悬步骤3的磁珠。
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