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龙图腾网获悉上海市口腔医院(上海市口腔健康中心)申请的专利一种慢性间歇性低氧肌肉损伤模型及其制备与应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN114908043B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-16发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202210472952.8，技术领域涉及：C12N5/077；该发明授权一种慢性间歇性低氧肌肉损伤模型及其制备与应用是由刘月华;李娇;刘婷姣;张维华;刘雪设计研发完成，并于2022-04-29向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种慢性间歇性低氧肌肉损伤模型及其制备与应用在说明书摘要公布了：本发明涉及肌肉芯片技术领域，尤其是涉及一种慢性间歇性低氧肌肉损伤模型及其制备与应用。本发明首先在聚四氟乙烯板表面设置通道层，得到阳模；再将聚二甲基硅氧烷灌注于阳模上，后处理得到阴模；利用硅胶材料制备与阴模相匹配的硅胶框架；然后将阴模与硅胶框架叠合，后处理得到肌肉芯片；最后将成肌细胞、细胞培养液与细胞外基质的替代物混匀得到混悬液，然后将混悬液置于预处理的肌肉芯片中诱导分化，通过精密控氧系统培养得到慢性间歇性低氧肌肉损伤模型。本发明采用微加工技术提供了一个新的研究平台，模拟肌肉的核心组织结构，实现肌肉关键生理功能，并可以将其更有效的应用在阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征研究中。

本发明授权一种慢性间歇性低氧肌肉损伤模型及其制备与应用在权利要求书中公布了：1.一种慢性间歇性低氧肌肉损伤模型的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： 1阳模的制备：在聚四氟乙烯板表面设置通道层，得到阳模； 所述通道层为两个平行哑铃状通道； 所述哑铃状通道包括连接通道以及连接通道两侧的端部通道； 所述通道的高度为1-2mm； 2阴模的制备：将聚二甲基硅氧烷灌注于步骤1制备得到的阳模上，后处理得到阴模； 所述后处理为静置过夜后烘干，然后冷却、揭膜得到阴模； 所述阴模为存在的两个平行哑铃状凹槽的聚二甲基硅氧烷板； 所述哑铃状凹槽包括连接凹槽以及连接凹槽两侧的端部凹槽；所述哑铃状凹槽与哑铃状通道相匹配； 所述聚二甲基硅氧烷板的长度和宽度分别与聚四氟乙烯板长度和宽度相同； 两个平行哑铃状凹槽的高度为1-2mm； 3框架的制备：利用硅胶材料制备与步骤2得到的阴模相匹配的硅胶框架； 所述硅胶框架为设置有方形孔洞的“回”字型框架；硅胶框架作为细胞两端的附着点，为细胞生长提供特定方向的单轴机械张力； 所述方形孔洞的长度与连接凹槽长度相同； 所述方形孔洞与硅胶框架外侧沿长度方向的距离与端部通道宽度相同； 所述方形孔洞的宽度比两个哑铃状凹槽沿宽度方向的最远距离大0.5-1.5mm； 所述硅胶框架高度为0.4-0.5mm； 4肌肉芯片的制备：将步骤2制备得到的阴模与步骤3制备得到的硅胶框架叠合，消毒处理得到肌肉芯片； 叠合方式具体为将硅胶框架置于阴模有哑铃状凹槽的一侧，并通过无菌针头进行固定； 5慢性间歇性低氧肌肉损伤模型的制备：将成肌细胞、细胞培养液与细胞外基质的替代物混匀得到混悬液，然后将混悬液置于预处理的肌肉芯片上，并放置于37℃、5%CO2的细胞培养箱内1小时，待Matrigel胶凝固后，加入DMEM细胞培养液进行3D细胞培养，待3D细胞培养3天稳定后，更换含有2%马血清的培养基进行诱导分化，通过精密控氧系统培养得到慢性间歇性低氧肌肉损伤模型； 精密控氧系统中，以低氧培养和常氧培养为一个循环，然后进行循环培养； 所述低氧培养过程中，保持培养环境中O2含量为1-10%，CO2含量为5%； 所述常氧培养过程中，保持培养环境中O2含量为21%，CO2含量为5%； 每个循环中，保持低氧培养时间为30-40分钟，保持常氧培养时间为20-30分钟； 整个循环过程持续3-96h； 所述预处理为将肌肉芯片浸入0.2%-2%PluronicF-127中以防止细胞粘附，静置后吸干； 所述细胞培养液为体积分数为10%FBS的培养基； 所述细胞外基质的替代物包括Matrigel胶、fibrinogen、凝血酶和抑肽酶； 成肌细胞、细胞培养液、Matrigel胶、fibrinogen、凝血酶和抑肽酶的用量比为7.5×105个：16-18μL：10μL：10μg：0.05U：0.08μg； 所述的DMEM细胞培养基包含体积浓度为10%FBS和1%双抗；所述的2%马血清的培养基包含体积浓度为97%DMEM和1%双抗； 诱导分化过程中，诱导分化时间为7-14天。

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