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龙图腾网获悉南京大学申请的专利一种基于比率型荧光探针的活性氧原位检测方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN120293925B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-12发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202510399326.4，技术领域涉及：G01N21/64；该发明授权一种基于比率型荧光探针的活性氧原位检测方法是由罗军;刘星;楚龙港;谷成设计研发完成，并于2025-04-01向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种基于比率型荧光探针的活性氧原位检测方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种活性氧的原位检测方法，包括以下步骤：将基于比率型荧光探针制备的活性氧复合膜贴合在待检测区域与活性氧反应；利用配备有520～540nm窄带滤光片的数码相机捕获活性氧复合膜上的绿光信号，得到图片A；利用配备有640～660nm滤光片的数码相机捕获活性氧复合膜上的红光信号，得到图片B；利用图像处理软件，对图片A和图片B进行数字化处理，分别获取图片A获取绿光通道的数值G和图片B红光通道的数值R，计算相对荧光强度FI作为活性氧响应值；将上述活性氧响应值FI代入活性氧浓度定量标准曲线，得到原位活性氧的浓度。本发明能够提高荧光信号的稳定性并解决环境扰动的问题，同时提高空间分辨率和土壤普适性。

本发明授权一种基于比率型荧光探针的活性氧原位检测方法在权利要求书中公布了：1.一种活性氧的原位检测方法，其特征在于，包括以下步骤： S1将基于比率型荧光探针制备的活性氧复合膜贴合在待检测区域与活性氧反应，反应的时间为4~70min，其中，所述活性氧复合膜的制备包括以下步骤： 步骤1：将2',7'-二氯二氢荧光素溶于乙腈溶剂中得到5~15mmolL的2',7'-二氯二氢荧光素母液；将尼罗红溶于乙腈溶剂中得到5~15mmolL的尼罗红母液； 步骤2：通过加热方式将琼脂糖溶解于水中，得到琼脂糖溶液； 步骤3：将所述琼脂糖溶液冷却至50~60℃后加入所述2',7'-二氯二氢荧光素母液和尼罗红母液，得到混合凝胶溶液，其中2',7'-二氯二氢荧光素和尼罗红的浓度均为40~60μmolL； 步骤4：将所述混合凝胶溶液注入模板中，冷却凝固后得到活性氧复合膜； S2利用490~510nm的LED灯作为激发光照射活性氧复合膜，利用配备有520~540nm窄带滤光片的数码相机捕获活性氧复合膜上的绿光信号，得到记录有绿光荧光强度的图片A； S3利用520~540nm的LED灯作为激发光照射活性氧复合膜，利用配备有640~660nm滤光片的数码相机捕获活性氧复合膜上的红光信号，得到记录有红光荧光强度的图片B； S4利用图像处理软件，对图片A和图片B进行数字化处理，分别获取图片A绿光通道的数值G1和图片B红光通道的数值R1，通过公式1计算相对荧光强度FI1作为活性氧响应值； S5将S4中的活性氧响应值FI1代入活性氧浓度定量标准曲线，得到原位活性氧的浓度。

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