安徽牧龙山铁皮石斛生物科技开发有限公司吕沙妹获国家专利权
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龙图腾网获悉安徽牧龙山铁皮石斛生物科技开发有限公司申请的专利一种铁皮石斛原球茎分化抑制及快速繁殖方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119969270B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-12发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510392368.5,技术领域涉及:A01H4/00;该发明授权一种铁皮石斛原球茎分化抑制及快速繁殖方法是由吕沙妹;秦朗;秦天宇;赵原野设计研发完成,并于2025-03-31向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种铁皮石斛原球茎分化抑制及快速繁殖方法在说明书摘要公布了:本发明公开一种铁皮石斛原球茎分化抑制及快速繁殖方法,该方法包括种子消毒处理、原球茎诱导、原球茎驯化、原球茎增殖四个步骤。本发明利用种子有效产生原球茎,创新性地采用液体驯化方式,在液体培养基中加入1μM水杨酸,显著抑制原球茎分化并提高其从液体培养基转移到固体培养基时的成活率,无激素培养方案快速获得大量原球茎产品,从而实现高效、可持续的生产过程。在整个培育过程中,未使用任何外源激素或化学合成物质,完全依赖自然诱导和有机物诱导产生的生物学机制,从源头上保障了产品的天然、安全性。本发明提高了原球茎的生产效率,缩短了石斛相关产品的生产周期,降低了原球茎的生产成本。
本发明授权一种铁皮石斛原球茎分化抑制及快速繁殖方法在权利要求书中公布了:1.一种铁皮石斛原球茎分化抑制及快速繁殖方法,其特征在于包括以下步骤: 1种子消毒处理,采摘10~11月份的石斛成熟且无病虫害的黄绿色果荚,对其进行消毒处理,作为原球茎形成的外植体; 2石斛原球茎诱导,在无菌操作台中,利用无菌解剖刀将消毒处理过的果荚切去顶端,漏出粉状种子,无菌镊子夹住果荚,将种子均匀撒播在原球茎诱导培养基中,培养40~60d即得石斛原球茎; 3石斛原球茎驯化,挑选步骤2中产生的饱满原球茎,接种至液体培养基中,培养30d,转移至固体培养基中培养30d; 4原球茎增殖,将步骤3中驯化的原球茎接种至原球茎增殖培养基中,培养30~60d,收获; 步骤1中果荚消毒采用乙醇和二氧化氯结合的方式,首先将采摘新鲜的果荚用清水洗去表面灰尘,转移至超净工作台中,用于清洗的容器提前使用75%乙醇浸泡,将果荚置入烧杯中,倒入75%乙醇完全浸泡,期间不断晃动,使果荚充分接触,消毒30s后使用无菌水冲洗3次,倒入浓度为250mgL二氧化氯溶液,完全浸没果荚,期间不断摇晃烧杯,消毒25min,无菌水冲洗3~5次,果荚晾干水分; 步骤2中原球茎诱导培养基由MS培养基、1gL蛋白胨、30gL白砂糖和5gL琼脂粉组成,培养基pH为5.4~5.6,为半固体状态; 步骤3中原球茎驯化的液体培养基由MS培养基、30gL白砂糖和1μM水杨酸,原球茎驯化的固体培养基由MS培养基、30gL白砂糖和5gL琼脂粉组成,驯化培养基的pH为5.8~6.0; 步骤4中原球茎增殖培养基由MS培养基、1gL蛋白胨、100gL土豆泥、20-30gL白砂糖和5gL琼脂粉组成,增殖培养基的pH为5.8~6.0。
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