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龙图腾网获悉湖南农业大学申请的专利一种棘胸蛙InDel分子标记用样本保存试剂及其制备方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119824108B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-12发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202510217035.9，技术领域涉及：C12Q1/6888；该发明授权一种棘胸蛙InDel分子标记用样本保存试剂及其制备方法是由向建国;张廖瑞林;廖小林;李鸿;李德亮;黄艳飞;刘新华;龚宇舟;张健;张恬谕;张家诺;李娟;何进荣;李湘设计研发完成，并于2025-02-26向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种棘胸蛙InDel分子标记用样本保存试剂及其制备方法在说明书摘要公布了：本发明涉及生物样本保存技术领域，具体涉及一种棘胸蛙InDel分子标记用样本保存试剂及其制备方法，通过缓冲液体系维持pH值稳定、核酸保护剂抑制核酸酶活性以及抗氧化剂清除自由基等多种作用机制，能够显著减少DNA在保存过程中的降解，确保DNA的完整性，为后续InDel分子标记的准确检测提供了可靠的模板，其中细胞稳定剂的使用可以在细胞周围形成保护膜，防止冰晶损伤细胞，并维持细胞的渗透压平衡，使细胞在保存过程中保持较高的活性，有利于后续从细胞中提取高质量的DNA；抗菌剂的加入能够有效抑制样本在保存过程中可能受到的微生物污染，延长样本的保存时间，确保样本的质量和安全性。

本发明授权一种棘胸蛙InDel分子标记用样本保存试剂及其制备方法在权利要求书中公布了：1.一种棘胸蛙InDel分子标记用样本保存试剂，其特征在于，由以下原料制备得到： 所述保存试剂包括缓冲液体系、核酸保护剂、细胞稳定剂、抗氧化剂和抗菌剂； 所述核酸保护剂、细胞稳定剂、抗氧化剂和抗菌剂用量依次为14-16mL、18-22mL、8-13mL和8-12mL； 所述缓冲液体系为EDTA溶解于在浓度为10-20mM、pH值在7.5-8.5之间的Tris-HCl缓冲液中得到的，其中EDTA的浓度为5-10mM； 所述核酸保护剂由纳米二氧化硅和阳离子脂质体制备得到； 所述细胞稳定剂为蔗糖、海藻糖、聚N-异丙基丙烯酰胺和乳酸乙酸共聚物混合得到； 所述抗氧化剂为艾地苯醌、锰卟啉、维生素C和谷胱甘肽制备得到； 所述抗菌剂为纳米银改性黄连素； 所述核酸保护剂的制备过程如下： 步骤A1.将纳米二氧化硅颗粒分散于无水乙醇中，超声处理，得到纳米二氧化硅乙醇悬浮液； 步骤A2.将二油酰基三甲基氯化铵溶解在氯仿中，在旋转蒸发仪上蒸发除去氯仿，形成脂质薄膜，再加入PBS缓冲液，超声处理，得到均匀的阳离子脂质体溶液； 步骤A3.将纳米二氧化硅乙醇悬浮液和阳离子脂质体溶液混合均匀，得到核酸保护剂； 所述细胞稳定剂的制备过程如下： 步骤B1.将聚N-异丙基丙烯酰胺和聚乳酸-羟基乙酸共聚物，分别加入到去离子水中，加热至52-58℃，并以280-320rpm的转速搅拌，直至完全溶解，然后将两种溶液混合均匀，得到聚合物溶液； 步骤B2.向聚合物溶液中加入蔗糖和海藻糖，混合均匀，使得蔗糖的浓度为100-120mM、海藻糖的浓度为50-70mM，得到细胞稳定剂； 步骤A1中所述纳米二氧化硅颗粒和无水乙醇的用量比为0.4-0.6g：45-55mL； 步骤A2中所述二油酰基三甲基氯化铵、氯仿和PBS缓冲液的用量比为0.18-0.22g：9.5-12mL：4-6mL； 步骤B1中所述聚N-异丙基丙烯酰胺和去离子水的用量比为1.8-2.2g：48-52mL；所述聚乳酸-羟基乙酸共聚物和去离子水的用量比为0.8-1.3g：48-52mL； 所述抗氧化剂的制备过程如下： 将艾地苯醌和锰卟啉，分别溶解在DMSO中，再加入维生素C和谷胱甘肽，最后加入PBS缓冲液稀释，使得维生素C的浓度为50-60μM、谷胱甘肽的浓度为20-30μM，得到抗氧化剂； 所述艾地苯醌和DMSO的用量比为0.008-0.012g：0.9-1.3mL； 所述锰卟啉和DMSO的用量比为0.0025-0.0035g：0.9-1.3mL； 所述抗菌剂的制备过程如下： 将黄连素和纳米银颗粒，分别加入到去离子水中，在超声清洗器中超声处理，使其均匀分散，然后混合均匀，得到抗菌剂混合溶液； 所述黄连素、纳米银颗粒和去离子水的用量比为0.075-0.085g：0.0045-0.0055g：46-53mL。

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