南京鼓楼医院王经琳获国家专利权
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龙图腾网获悉南京鼓楼医院申请的专利一种高表达糖苷酶的外泌体系统及其制备方法和应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119265243B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-12发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411584403.5,技术领域涉及:C12N15/867;该发明授权一种高表达糖苷酶的外泌体系统及其制备方法和应用是由王经琳;任昊桢设计研发完成,并于2024-11-07向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种高表达糖苷酶的外泌体系统及其制备方法和应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种用于治疗基于葡萄糖代谢的脂肪肝相关肝癌的仿生高表达糖苷酶的外泌体系统及制备方法,通过慢病毒转染将糖苷酶序列转染到间充质干细胞上,然后通过超速离心法获得外泌体用于脂肪肝相关肝癌的治疗。本发明的外泌体仿生系统具有靶向迁移能力,低免疫原性,提高了运输生物活性物质的能力,使中断的葡萄糖代谢正常化,减少了内质网应激,抑制了上皮‑间质转化信号传导。通过体内和体外实验两个方面验证了其在体外能有效靶向癌细胞,减少O‑GlcNAc的异常修饰,抑制肿瘤恶性行为;在体内到达脂肪肝相关性肝癌后,能降低O‑GlcNAc修饰水平,恢复被破坏的代谢,从而抑制癌症的进展。
本发明授权一种高表达糖苷酶的外泌体系统及其制备方法和应用在权利要求书中公布了:1.一种高表达糖苷酶O-GlcNAcaseOGA的外泌体系统在制备用于治疗脂肪肝相关肝癌药物中的应用,其特征在于,所述外泌体系统是通过慢病毒转染将糖苷酶序列转染到人间充质干细胞上,然后通过超速离心法获得,所述外泌体是球形形貌,平均直径为120nm~125nm;所述的高表达糖苷酶的外泌体系统的制备步骤如下: 步骤1人间充质干细胞的制备; 步骤2高表达糖苷酶O-GlcNAcaseOGA的人间充质干细胞的制备,通过慢病毒转染将高表达糖苷酶慢病毒颗粒用培养基稀释,将人间充质干细胞加入到培养基中,在培养箱中共同孵育,通过添加嘌呤霉素选择表达耐药基因的转染细胞,直到没有细胞死亡; 步骤3高表达糖苷酶的外泌体的制备,将人间充质干细胞培养在缺乏外泌体的培养基中,对培养基一次离心、二次离心后获得外泌体系统,所述的一次离心步骤为:在室温条件下,依次对培养基300×g的离心速度10分钟、2000×g离心速度10分钟、10000×g离心速度30分钟,将获得的沉淀颗粒重悬于PBS中;所述的二次离心步骤为:将一次离心得到的沉淀在4℃、100000×g离心速度下离心70分钟,去除上清,获得的沉淀即外泌体。
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